DE102006024748A1

DE102006024748A1 - Use of metalloprotease inhibitors such as polyacrylate for the preparation of an agent to treat chronic wound

Info

Publication number: DE102006024748A1
Application number: DE102006024748A
Authority: DE
Inventors: Hans Priv.-Doz. Dr. med. Smola
Original assignee: Paul Hartmann AG
Current assignee: Paul Hartmann AG
Priority date: 2006-05-26
Filing date: 2006-05-26
Publication date: 2007-11-29
Also published as: WO2007137733A2; WO2007137733A3

Abstract

Use of metalloprotease inhibitors (I) such as polyacrylate for the preparation of an agent to treat chronic wound. Independent claims are included for: (1) a metalloprotease inhibitor such as polyacrylate; and (2) wound pad comprising the metalloprotease inhibitor. ACTIVITY : Vulnerary. MECHANISM OF ACTION : Matrix metalloprotease inhibitor. The matrix metalloprotease inhibiting activity of (I) to treat wound was tested in-patient. The result showed that (I) exhibited 100% enzyme activity against the wound.

Description

Die Erfindung betrifft Proteasen-Inhibitoren insbesondere zur Wundbehandlung sowie eine Wundauflage und deren Verwendung in der modernen Wundbehandlung.The The invention relates to protease inhibitors, in particular for wound treatment as well as a wound dressing and its use in modern wound treatment.

Die Aktivität eines Enzyms kann auf verschiedenste Art und Weise beeinflusst werden. So kann beispielsweise die Aktivität des Enzyms durch Einflussnahme auf das Enzymprotein selbst, auf das Coenzym oder auf das Substrat herauf oder herab gesetzt werden. Diese Einflussnahme kann nicht nur durch Inhibitoren oder Aktivatoren erfolgen, sondern auch durch äußere Faktoren wie beispielsweise Temperatur, pH-Wert, Ionenstärke oder die Polarität des Lösungsmittels. Eine Beeinflussung durch die zuletzt genannten Faktoren erfolgt unspezifisch durch Modifikation der Enzymstruktur über Oberflächeneffekte z.B. Wechselwirkungen mit geladenen Gruppen oder Störungen der Hydrathülle. Das aktive Zentrum wird dabei nicht gezielt beeinflusst.The activity of an enzyme can be influenced in many different ways. For example, the activity of the enzyme can be influenced on the enzyme protein itself, on the coenzyme or on the substrate be raised or lowered. This influence can not only by inhibitors or activators, but also by external factors such as temperature, pH, ionic strength or the polarity of the solvent. An influence by the latter factors takes place nonspecific by modification of the enzyme structure via surface effects e.g. Interactions with charged groups or disorders of the Hydration. The active center is not specifically influenced.

Unter Enzymhemmung (Inhibition) ist die negative Beeinflussung der Enzymaktivität bzw. die Herabsetzung der katalytischen Aktivität eines Enzyms oder Coenzyms durch spezifische oder unspezifische Hemmstoffe oder Inhibitoren zu verstehen. Hierbei kann die Inhibition reversibel oder irreversibel erfolgen.Under Enzyme inhibition (inhibition) is the negative influence on the enzyme activity or the Reduction of the catalytic activity of an enzyme or coenzyme by specific or unspecific inhibitors or inhibitors to understand. In this case, the inhibition can be reversible or irreversible respectively.

Eine irreversible Enzyminhibition ist in der Regel die Folge einer kovalenten Verknüpfung des Inhibitors mit dem aktiven Zentrum des Enzyms. Bei diesen irreversiblen Inhibitoren handelt es sich um Substanzen, welche zunächst vom Enzym als Substrat erkannt und in das aktive Zentrum aufgenommen werden. Dort gehen die Inhibitoren eine feste kovalente Bindung mit Aminosäureresten des aktiven Zentrums ein, wodurch dieses dauerhaft blockiert wird. Ein bekannter irreversibler Inhibitor ist das Antibiotikum Penicillin, welches ein Enzym der bakteriellen Zellwandsynthese irreversibel ausschalten kann.A irreversible enzyme inhibition is usually the result of a covalent shortcut of the inhibitor with the active site of the enzyme. In these irreversible Inhibitors are substances which are first of the Enzyme detected as a substrate and absorbed into the active site become. There, the inhibitors go a solid covalent bond with amino acid residues active center, blocking it permanently. A known irreversible inhibitor is the antibiotic penicillin, which is an enzyme of bacterial cell wall synthesis irreversible can turn off.

Die sogenannte reversible Enzymhemmung ist grundsätzlich umkehrbar und spielt bei der Feinregulation des Stoffwechsels in lebenden Organismen eine entscheidende Rolle. Die reversible Hemmung wird weiterhin in die kompetitive Hemmung und die nicht-kompetitive Hemmung unterschieden. Bei der kompetitiven Hemmung konkurriert das Substrat mit dem Hemmstoff um die Bindung an das aktive Zentrum des Enzyms. Da das Substrat und der Inhibitor nicht gleichzeitig an das Enzym binden können und der Inhibitor im Gegensatz zum Substrat nicht enzymatisch umsetzbar ist, wird die messbare Enzymaktivität vermindert. Mit zunehmender Konzentration des Inhibitors findet eine zunehmende Verdrängung des Substrats statt, wodurch eine Verminderung der Enzymaktivität erfolgt. Eine Erhöhung der Substratkonzentration kehrt diesen Vorgang um und ermöglicht eine vermehrte Substratumsetzung. Im Fall der nicht-kompetitiven Hemmung bindet der Hemmstoff außerhalb des aktiven Zentrums sowohl an das freie Enzym als auch an den Enzym/Substrat-Komplex. Die Bindung des Inhibitors führt nicht zur Inhibition der Substratbindung, sondern zu einer Konformationsänderung des Enzyms, das dadurch inaktiviert wird. Die Bindung des Inhibitors und die Inaktivierung des Enzyms finden unabhängig vom Vorhandensein von Substrat statt.The so-called reversible enzyme inhibition is basically reversible and plays in the fine regulation of metabolism in living organisms a crucial role. The reversible inhibition will continue distinguished into competitive inhibition and non-competitive inhibition. In competitive inhibition, the substrate competes with the inhibitor to bind to the active site of the enzyme. Because the substrate and the inhibitor can not simultaneously bind to the enzyme and the inhibitor, in contrast to the substrate, can not be converted enzymatically is, the measurable enzyme activity is reduced. With increasing Concentration of the inhibitor finds an increasing displacement of the Substrate instead, whereby a reduction of the enzyme activity takes place. An increase the substrate concentration reverses this process and allows for a increased substrate conversion. In the case of non-competitive inhibition binds the inhibitor outside of the active site to both the free enzyme and the enzyme / substrate complex. The binding of the inhibitor leads not to inhibit substrate binding, but to a conformational change the enzyme that is thereby inactivated. The binding of the inhibitor and the inactivation of the enzyme find independent of the presence of Substrate instead.

Proteasen (Peptidasen, Peptid-Hydrolasen) sind Enzyme, welche die hydrolytische Spaltung einer Peptid-Bindung in Proteinen und Peptiden (Proteolyse) katalysieren. Proteasen gehören damit systematisch zu der Gruppe der Hydrolasen. Proteasen werden hinsichtlich des Spaltungsortes im Substrat unterteilt. So wird die Spaltung von Peptidbindungen im Inneren von Peptiden oder Proteinen durch Endopeptidasen (Proteinasen) katalysiert, wogegen Peptidbindungen am Ende eines Peptid- oder Proteinmoleküls durch Exopeptidasen (früher Peptidasen) gespalten werden.proteases (Peptidases, peptide hydrolases) are enzymes that hydrolytic Cleavage of a peptide bond in proteins and peptides (proteolysis) catalyze. Proteases belong thus systematically to the group of hydrolases. Proteases divided with respect to the cleavage site in the substrate. So will the cleavage of peptide bonds inside peptides or proteins catalyzed by endopeptidases (proteinases), whereas peptide bonds at the end of a peptide or protein molecule by exopeptidases (formerly peptidases) be split.

Eine weitere Unterscheidung der Proteasen wird hinsichtlich ihrer im aktiven Zentrum für die Katalyse verantwortlichen Gruppen getroffen. So werden beispielsweise a) Serin-Proteasen, b) Cystein-Proteasen, c) Aspartat-Proteasen und d) Metallo-Proteasen voneinander unterschieden. Die Gruppe der Metallo-Proteasen (Metallo-Peptidasen) weisen beispielsweise in ihrem aktiven Zentrum Metallionen auf, die an dem katalytischen Mechanismus der Proteolyse beteiligt sind. Diese Metallionen, insbesondere divalente Metallkationen wie Magnesium, Zink, Calcium, Eisen u.a., werden auch als Coenzym betrachtet. Gemäß dem oben beschriebenen Unterscheidungsmerkmal gibt es weiterhin a) Metallo-Endopeptidasen (Metallo-Proteinasen) und b) Metallo-Exopeptidasen.A Further differentiation of the proteases will be with regard to their in the active center for met the catalysis responsible groups. For example a) serine proteases, b) cysteine proteases, c) aspartate proteases and d) metallo proteases from each other distinguished. The group of metallo-proteases (metallo-peptidases) have, for example, metal ions in their active center, involved in the catalytic mechanism of proteolysis. These metal ions, especially divalent metal cations such as magnesium, Zinc, calcium, iron and the like are also considered coenzyme. According to the above Furthermore, there are a) metallo-endopeptidases (Metallo-proteinases) and b) metallo-exopeptidases.

Matrix-Metallo-Proteasen (MMP) – auch Matrixine genannt – gehören zu einer Familie von Proteasen, die durch strukturelle Homologien definiert worden sind. Ihre enzymatische Aktivität ist abhängig von Metallionen im aktiven Zentrum. Metallo-Proteasen wurden zuerst durch ihre Rolle beim Gewebe-Umbau identifiziert, insbesondere durch den Abbau der extrazellulären Matrix. Systematisch gehört diese Gruppe der Proteasen zu den Metallo-Endopeptidasen (Metallo-Proteinasen). Zu den Matrix-Metallo-Proteinasen gehören unter anderem die Collagenasen, Gelatinasen, Stromeolysine, Matrilysin u.a.. Eine Übersicht und Einteilung ist in der Fachliteratur bei Parks, Matrix Metalloproteinases, Biology of Extracellular Matrix Series, Ed. Mecham, R. P., Academic Press, Inc., San Diego, Calif. (1998) und in der unten stehenden Tabelle 1 zu finden. In dieser Tabelle 1 sind Synonyme und gegebenenfalls, die Nummerierung der Enzyme gemäß der Enzym Commision (EC) angegeben. Die Matrix-Metallo-Proteinasen werden als inaktive Vorstufen synthetisiert und sezerniert. Durch komplexe, derzeit noch nicht im Detail endgültig geklärte Mechanismen werden sie in die aktive Form überführt. Alle Metallo-Proteasen können durch Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA) gehemmt werden.Matrix metallo-proteases (MMPs) - also called matrixins - belong to a family of proteases that have been defined by structural homologies. Their enzymatic activity is dependent on metal ions in the active center. Metallo proteases were first identified by their role in tissue remodeling, particularly by degradation of the extracellular matrix. Systematically, this group of proteases belongs to the metallo-endopeptidases (metalloproteinases). The matrix metalloproteinases include collagenases, gelatinases, stromeolysins, matrilysin and others. An overview and classification is in the Parks Literature, Matrix Metalloproteinases, Biology of Extra Cellular Matrix Series, Ed. Mecham, RP, Academic Press, Inc., San Diego, Calif. (1998) and in Table 1 below. Synonyms and, where appropriate, the numbering of the enzymes according to the Enzyme Commision (EC) are given in Table 1. The matrix metalloproteinases are synthesized and secreted as inactive precursors. Complex mechanisms that have not yet been finally clarified in detail will convert them into the active form. All metallo proteases can be inhibited by ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA).

Serin-Proteasen weisen im aktiven Zentrum einen für die Katalyse essentiellen L-Serin-Rest auf, der durch Diisopropylfluorophosphat inhibiert werden kann. Auch diesen Proteasen wird in der Wundheilung eine entscheidende Funktion zugeschrieben. Zu der Gruppe der Serin-Proteasen behören beispielsweise Chromotrypsin, Elastase, Kallikrein, Plasmin, Trypsin, Thrombin u.a.. Die meisten bekannten Serin-Proteasen weisen neben dem L-Serin-Rest in ihrem aktiven Zentrum die Reste der Aminosäuren L-Histidin und L-Asparagin auf. Alle drei Aminosäurereste nehmen bei der Protolyse an einer Kaskade von Reaktionen teil, in der ein Proton des L-Serin-Restes auf das Substrat übertragen wird. Insoweit sich ein Serin-abhängiger Mechanismus bei Proteinasen findet, spricht man auch von Serin-Proteinasen.Serine proteases have an essential for catalysis in the active center L-serine residue on, which can be inhibited by diisopropylfluorophosphate. Also These proteases become a crucial function in wound healing attributed. For example, belong to the group of serine proteases Chromotrypsin, elastase, kallikrein, plasmin, trypsin, thrombin et al. Most known serine proteases have the L-serine residue in its active center, the residues of the amino acids L-histidine and L-asparagine on. All three amino acid residues participate in a cascade of reactions during protolysis, in which transfer a proton of the L-serine residue onto the substrate becomes. As far as a serine-dependent mechanism in proteinases one also speaks of serine proteinases.

Tabelle 1: Matrix-Metallo-Proteasen (MMP)

Table 1: Matrix metallo-proteases (MMP)

Matrix-Metallo-Proteasen wird in der Wundheilung eine entscheidende Funktion zugeschrieben. So benötigen beispielsweise Keratinozyten zur Migration über die provisorische Matrix mit dem Ziel des epithelialen Wundschlusses Matrix-Metallo-Proteasen (Pitcher et al., 1997; Beare et al., 2003; Mirastschijski et al., 2004). Diese Metallo-Proteasen werden in Zellen als inaktive Proform gebildet, aus der Zelle sezerniert und im extrazellulären Milieu aktiviert (limitierte Proteolyse). Sie sind durch strukturelle Gemeinsamkeiten gekennzeichnet und benötigen für die proteolytische Aktivität divalente Ionen im aktiven Zentrum. Erst nach Aktivierung und in Gegenwart von Ca²⁺- oder Zn²⁺- Ionen können sie die jeweiligen Substrate abbauen (Übersicht in Nagase und Woessner 1999).Matrix metalloproteases are believed to play a crucial role in wound healing. For example, keratinocytes require matrix metallo proteases to migrate across the provisional matrix for epithelial wound closure (Pitcher et al., 1997, Beare et al., 2003, Mirastschijski et al., 2004). These metallo proteases are formed in cells as an inactive pro form, secreted from the cell, and im extracellular milieu activated (limited proteolysis). They are characterized by structural similarities and require divalent ions in the active site for proteolytic activity. Only after activation and in the presence of Ca ²⁺ or Zn ²⁺ ions can they degrade the respective substrates (review in Nagase and Woessner 1999).

In neueren Arbeiten auf dem Gebiet der Wundbehandlung konnte festgestellt werden, dass mit einer pathologischen Wundheilung eine überschießende Proteaseaktivität im Wundsekret assoziiert ist (Trengove et al., 1999; Wysocki et al., 1993; Weckroth et al., 1996). Experimentell konnte weiterhin gezeigt werden, dass eine erhöhte MMP-Expression in der Haut die Wundheilung deutlich verzögert (Di Colandrea et al., 1998). Weiterhin hat sich gezeigt, dass mit einer exzessiven Proteaseaktivität eine Abnahme der Wachstumsfaktoren zu verzeichnen ist (Tengrove et al., 2003). Es hat sich darüber hinaus gezeigt, dass in chronischen Wunden die extrazelluläre Matrix (Wysocki et al., 1990), Wachstumsfaktoren (Duckworth et al., 2004; Lauer et al., 2000) und deren Rezeptoren (Eming et al., 2004) abgebaut werden, so dass im Wundareal ein relatives Defizit an diesen Stoffen entsteht. Damit behindert eine exzessive Protease-Aktivität, insbesondere eine exzessive Metallo-Proteasen-Aktivität die Wundheilung in außerordentlichem Maß. Versuche, diese Proteaseaktivität durch spezifische Inhibitoren pharmakologisch zu reduzieren, waren bislang nicht erfolgreich.In recent work in the field of wound treatment was noted become that with a pathological wound healing an excessive protease activity in the wound secretion (Trengove et al., 1999; Wysocki et al., 1993; Weckroth et al., 1996). Experimentally it could be shown that a increased MMP expression in significantly retards wound healing (Di Colandrea et al., 1998). Furthermore, it has been shown that with excessive protease activity a decrease growth factors (Tengrove et al., 2003). It's about it In addition, in chronic wounds, the extracellular matrix (Wysocki et al., 1990), growth factors (Duckworth et al., 2004; Lauer et al., 2000) and their receptors (Eming et al., 2004) so that in the wound area a relative deficit of these substances arises. This hinders excessive protease activity, in particular an excessive metallo-protease activity causes wound healing in extraordinary Measure. Tries, this protease activity were pharmacologically reduced by specific inhibitors so far not successful.

Daher ist es eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ein verbessertes Mittel zur Behandlung von chronischen Wunden bereitzustellen. Darüber hinaus soll ein Mittel bereitgestellt werden, das den pathologischen Zustand einer Wunde derart beeinflusst, dass ein normaler, natürlicher Wundheilungsverlauf stattfinden kann.Therefore it is an object of the present invention an improved To provide agents for the treatment of chronic wounds. Furthermore should be provided a means that the pathological condition of a wound so influenced that a normal, more natural Wound healing process can take place.

Überraschenderweise wird diese Aufgabe durch Metallo-Proteasen-Inhibitoren aus der Gruppe der Polyacrylate gelöst. Insbesondere hat sich gezeigt, dass diese Polyacrylate Metallo-Proteasen über diffusible Mechanismen inhibieren als auch durch direkte Bindung kompartmentieren und damit dem Wundexsudat bzw. der Wunde entziehen können. Damit betrifft die vorliegende Erfindung auch die Verwendung eines Metallo-Proteasen-Inhibitors aus der Gruppe der Polyacrylate zur Herstellung eines Mittels zur Behandlung von chronischen Wunden.Surprisingly This task is accomplished by metallo-protease inhibitors from the group the polyacrylates dissolved. In particular, it has been shown that these polyacrylates metallo proteases via diffusible mechanisms inhibit as well as by direct binding compartmentalize and thus can escape the wound exudate or the wound. This concerns the present The invention also relates to the use of a metallo-protease inhibitor from the Group of polyacrylates for the preparation of an agent for treatment from chronic wounds.

Hierbei wird im Rahmen der vorliegenden Erfindung unter einem Polyacrylat ein synthetisches Polymer umfassend als Monomer (M1) Acrylsäure (2-Propensäure, CH₂=CH-CO₂H) und/oder ein Salz hiervon verstanden, das einen Monomeranteil von mehr als 70 Gew.-% Acrylsäure und/oder eines Salzes hiervon (bezogen auf das Gesamtgewicht des Polyacrylats) aufweist. Insbesondere weisen erfindungsgemäße Polyacrylate einen Monomeranteil von mehr als 80 Gew.-% Acrylsäure und/oder eines Salzes hiervon und ganz besonders bevorzugt mehr als 95 Gew.-% Acrylsäure und/oder eines Salzes hiervon bezogen auf das Gesamtgewicht des Polyacrylats auf. Dabei kann das Polyacrylat als Homopolymer, Copolymer oder Blockpolymer vorliegen. Falls das Polyacrylat als Copolymer oder Blockpolymer vorliegt, so liegt in jedem Fall der Monomeranteil des Monomers M1 in dem Polymer bei mehr als 70%, insbesondere bei mehr als 80% und ganz besonders bevorzugt bei mehr als 95% bezogen auf das Gesamtgewicht des Polyacrylats. In diesen copolymeren Polyacrylaten oder blockpolymeren Polyacrylaten können neben dem Monomer M1 als Comonomere M2 insbesondere α,β-ungesättigte Ether (Vinylether), α,β-ungesättigte Carbonsäuren oder α,β-ungesättigte Carbonsäureester (Vinylester) enthalten sein. Von den Comonomeren M2 der α,β-ungesättigten Carbonsäuren werden besonders Methacrylsäure (2-Methylpropensäure), Ethacrylsäure (2-Ethylpropensäure), Crotonsäure (2-Butensäure), Sorbinsäure (trans-trans-2,4-Hexadiensäure), Maleinsäure (cis-2-Butendisäure) oder Fumarsäure (trans-2-Butendisäure) bevorzugt. In einer besonders bevorzugten Form der Erfindung kann jedoch auch vorgesehen sein, dass das Polyacrylat aus a) einem Homopolymer aus Acrylsäure und/oder b) einem Copolymer aus i) Acrylsäure und einem Salz der Acrylsäure, ii) aus Methacrylsäure und einem Salz der Methacrylsäure oder iii) aus Acrylsäure und Methacrylsäure und deren Salze besteht. Weiterhin kann jedoch auch vorgesehen sein, dass es sich bei dem Polyacrylat um eine Mischung von verschiedenen Polyacrylaten handelt.In the context of the present invention, a polyacrylate is understood as meaning a synthetic polymer comprising as monomer (M1) acrylic acid (2-propenoic acid, CH ₂ = CH-CO ₂ H) and / or a salt thereof which has a monomer content of more than 70% by weight .-% acrylic acid and / or a salt thereof (based on the total weight of the polyacrylate). In particular, polyacrylates according to the invention have a monomer content of more than 80% by weight of acrylic acid and / or a salt thereof and very particularly preferably more than 95% by weight of acrylic acid and / or a salt thereof, based on the total weight of the polyacrylate. In this case, the polyacrylate may be present as homopolymer, copolymer or block polymer. In any event, if the polyacrylate is a copolymer or block polymer, the monomer content of monomer M1 in the polymer is greater than 70%, more preferably greater than 80% and most preferably greater than 95%, based on the total weight of the polyacrylate. In these copolymeric polyacrylates or block polymer polyacrylates in addition to the monomer M1 as comonomers M2 in particular α, β-unsaturated ethers (vinyl ethers), α, β-unsaturated carboxylic acids or α, β-unsaturated carboxylic acid esters (vinyl esters) may be included. Of the comonomers M2 of the α, β-unsaturated carboxylic acids, especially methacrylic acid (2-methylpropenoic acid), ethacrylic acid (2-ethylpropenoic acid), crotonic acid (2-butenoic acid), sorbic acid (trans-trans-2,4-hexadienoic acid), maleic acid (cis 2-butenedioic acid) or fumaric acid (trans-2-butenedioic acid). In a particularly preferred form of the invention, however, it can also be provided that the polyacrylate is composed of a) a homopolymer of acrylic acid and / or b) a copolymer of i) acrylic acid and a salt of acrylic acid, ii) methacrylic acid and a salt of methacrylic acid or iii) consists of acrylic acid and methacrylic acid and their salts. Furthermore, however, it can also be provided that the polyacrylate is a mixture of different polyacrylates.

Hierbei können insbesondere die α,β-ungesättigten Carbonsäuren als auch die Acrylsäure in neutralisierter Form als Salz, in nicht-neutralisierter Form als freie Säure oder in Mischungen hiervon vorliegen. Insbesondere haben sich Polyacrylate, die aus Acrylsäure und Salzen der Acrylsäure aufgebaut sind als besonders wirksam gezeigt. Dabei sind insbesondere Alkalimetall- oder Erdalkalimetallsalze hervorzuheben. Insbesondere zeigten sich Polyacrylate, die aus Homopolymeren und/oder aus Copolymeren bestehen, die als Monomere Acrylsäure und/oder Natrium- oder Kaliumacrylat umfassen, als besonders wirksam.in this connection can in particular the α, β-unsaturated carboxylic acids as well as the acrylic acid in neutralized form as salt, in unneutralized form as a free acid or in mixtures thereof. In particular, polyacrylates, made of acrylic acid and salts of acrylic acid constructed are shown as being particularly effective. Here are in particular To emphasize alkali metal or alkaline earth metal salts. Especially showed polyacrylates, which consist of homopolymers and / or copolymers consist of acrylic acid and / or sodium or as monomers Potassium acrylate, as particularly effective.

Weiterhin hat sich in überraschender Weise gezeigt, dass die vorliegende Aufgabe in besonderes hervorzuhebender Weise durch Metallo-Protease-Inhibitoren aus der Gruppe der vernetzen und/oder quervernetzten Polyacrylate gelöst wird. Diese Polyacrylate umfassen vorzugsweise a) ein Homopolymer, das aus den Monomeren M1 besteht und mittels eines Vernetzers vernetzt und/oder quervernetzt ist, und/oder b) ein Copolymer, das aus den Monomeren M1 und M3 besteht, wobei das Monomer M1 Acrylsäure und/ oder ein Salz hiervon ist und das Monomer M3 aus der Gruppe der Vernetzer gewählt wird. Das heißt, dass diese Polyacrylate ein mittels eines Vernetzers nachträglich vernetztes Polyacrylat und/oder ein Polyacrylat umfassen, das aus Acrylsäure und/oder einem Salz hiervon und einem Vernetzer copolymerisiert ist.Furthermore, it has surprisingly been found that the present object is achieved in a special way to be highlighted by metallo-protease inhibitors from the group of crosslinked and / or crosslinked polyacrylates. These polyacrylates preferably comprise a) a homopolymer derived from the Monomers M1 and is crosslinked and / or crosslinked by means of a crosslinker, and / or b) a copolymer consisting of the monomers M1 and M3, wherein the monomer M1 is acrylic acid and / or a salt thereof and the monomer M3 from the group the crosslinker is selected. That is, these polyacrylates include a post-crosslinked polyacrylate and / or a polyacrylate copolymerized from acrylic acid and / or a salt thereof and a crosslinker.

Damit ist auch die Verwendung eines Polyacrylats, das a) ein Homopolymer umfasst, das aus den Monomeren M1 besteht und mittels eines Vernetzers vernetzt und/oder quervernetzt ist, und/oder b) ein Copolymer umfasst, das aus den Monomeren M1 und M3 besteht, wobei das Monomer M1 Acrylsäure und/oder ein Salz hiervon ist und das Monomer M3 aus der Gruppe der Vernetzer gewählt wird, zur Herstellung eines Mittels zur Behandlung von chronischen Wunden Gegenstand der vorliegenden Erfindung.In order to is also the use of a polyacrylate which is a) a homopolymer which consists of the monomers M1 and by means of a crosslinking agent crosslinked and / or crosslinked, and / or b) comprises a copolymer, consisting of the monomers M1 and M3, wherein the monomer M1 is acrylic acid and / or a salt thereof and the monomer M3 from the group of crosslinkers chosen is used to prepare a remedy for chronic Wounds subject of the present invention.

Insbesondere hat sich gezeigt, dass vernetze und/oder quervernetzte Polyacrylate, die als Vernetzer Verbindungen V1 enthalten, die mindestens zwei ethylenisch ungesättigte Gruppen innerhalb eines Moleküls aufweisen, oder Verbindungen V2, die mindestens zwei funktionelle Gruppen aufweisen, die mit funktionellen Gruppen der Acrylsäure oder/und eines Salzes hiervon in einer Kondensationsreaktion, in einer Additionsreaktion oder in einer Ringöffnungsreaktion reagieren können, oder Verbindungen V3, die mindestens eine ethylenisch ungesättigte Gruppe und mindestens eine funktionelle Gruppe, die mit funktionellen Gruppen der Acrylsäure und/oder eines seiner Salze und/oder den α,β-ungesättigte Comonomere in einer Kondensationsreaktion, in einer Additionsreaktion oder in einer Ringöffnungsreaktion reagieren kann, besonders wirksam sind. Dabei wird durch die Verbindungen V1 eine Vernetzung der Polymere durch die radikalische Polymerisation der ethylenisch ungesättigten Gruppen des Vernetzermoleküls mit den monoethylenisch ungesättigten Monomeren Acrylsäure und/oder eines seiner Salze und/oder einer der α,β-ungesättigte Comonomere erreicht, während bei den Verbindungen V2 eine Vernetzung der Polymere durch Kondensationsreaktion der funktionellen Gruppen mit den funktionellen Gruppen der Acrylsäure und/oder eines seiner Salze oder einer α,β-ungesättigte der Comonomere erreicht wird. Bei den Verbindungen V3 erfolgt dementsprechend eine Vernetzung des Polymers sowohl durch radikalische Polymerisation der ethylenisch ungesättigten Gruppe als auch durch Kondensationsreaktion zwischen der funktionellen Gruppe des Vernetzers und den funktionellen Gruppen der Monomeren.Especially it has been found that crosslinked and / or crosslinked polyacrylates, containing as crosslinkers compounds V1, the at least two ethylenically unsaturated Have groups within a molecule, or compounds V2 which have at least two functional groups, those with functional groups of acrylic acid and / or a salt thereof in a condensation reaction, in an addition reaction or in a ring opening reaction can react, or compounds V3 containing at least one ethylenically unsaturated group and at least one functional group functional with functional groups the acrylic acid and / or one of its salts and / or the α, β-unsaturated comonomers in one Condensation reaction, in an addition reaction or in a Ring-opening reaction can react, are particularly effective. It is through the connections V1 a crosslinking of the polymers by the radical polymerization the ethylenically unsaturated Groups of the crosslinker molecule with the monoethylenically unsaturated Monomeric acrylic acid and / or one of its salts and / or one of the α, β-unsaturated comonomers, while in the compounds V2 crosslinking of the polymers by condensation reaction the functional groups with the functional groups of the acrylic acid and / or one of its salts or an α, β-unsaturated one of Comonomer is achieved. In the case of the connections V3, this takes place accordingly a crosslinking of the polymer by both radical polymerization the ethylenically unsaturated Group as well as by condensation reaction between the functional Group of the crosslinker and the functional groups of the monomers.

Bevorzugte Verbindungen V1 sind Polyacrylsäureester oder Polymethacrylsäureester, die beispielsweise durch die Umsetzung eines Polyols, wie beispielsweise Ethylenglykol (1,2-Ethandiol), Propylenglykol (1,2-Propandiol), Trimethylolpropan (2-Ethyl-2-hydroxymethyl-1,3-propandiol), 1,6-Hexandiol, Glycerin (1,2,3-Propantriol), Pentaerythrit (2,2- Bis(hydroxymethyl)propan-1,3-diol), Polyethylenglykol (HO-(CH₂-CH₂-O)_n-H mit n = 2 bis 20) mit n = 1 bis 20), Polypropylenglykol (HO-(CH(CH₃)-CH₂-O)_n-H mit n = 2 bis 20), eines Aminoalkohols, eines Polyalkylenpolyaminens, wie beispielsweise Diethylentriamin oder Triethylentetraamin, oder eines alkoxylierten Polyols mit Acrylsäure oder Methacrylsäure gewonnen werden. Besonders bevorzugt kann es sich bei dem vernetzten Polyacrylaten um ein Polyacrylat handeln, das mittels einer Verbindung V1 vernetzt ist, die ein Di-, Tri- oder Tetraester der Polyacrylsäure oder Polymethacrylsäure ist, der durch die Umsetzung eines alkoxylierten Polyols, insbesondere eines ethoxylierten Polyols, insbesondere ethoxyliertes Ethylenglycol, ethoxyliertes Propylenglycol, ethoxyliertes Trimethylolpropan, ethoxyliertes 1,6-Hexandiol oder ethoxyliertes Glycerin, mit einer durchschnittlichen Anzahl an Ethylenoxideinheiten n pro Hydroxygruppe von n = 1 bis 10 mit Acrylsäure oder Methacrylsäure gewonnen werden. Als Verbindungen V1 sind des Weiteren Polyvinylverbindungen, Polyallylverbindungen, Polymethylallylverbindungen, Acrylsäureester oder Methacrylsäureester einer Monovinylverbindung, Acrylsäureester oder Methacrylsäureester einer Monoallylverbindung oder Monomethylallylverbindung, vorzugsweise der Monoallylverbindungen oder Monomethylallylverbindungen eines Polyols oder eines Aminoalkohols, bevorzugt. In diesem Zusammenhang wird auf DE 195 43 366 , DE 195 43 368 verwiesen.Preferred compounds V1 are polyacrylic acid esters or polymethacrylic acid esters obtained, for example, by the reaction of a polyol, such as, for example, ethylene glycol (1,2-ethanediol), propylene glycol (1,2-propanediol), trimethylolpropane (2-ethyl-2-hydroxymethyl-1,3-propanediol). propanediol), 1,6-hexanediol, glycerol (1,2,3-propanetriol), pentaerythritol (2,2-bis (hydroxymethyl) propane-1,3-diol), polyethylene glycol (HO- (CH ₂ -CH ₂ - O) _n -H where n = 2 to 20) where n = 1 to 20), polypropylene glycol (HO- (CH (CH ₃ ) -CH ₂ -O) _n -H where n = 2 to 20), an aminoalcohol, a polyalkylenepolyamine, such as diethylenetriamine or triethylenetetraamine, or an alkoxylated polyol with acrylic acid or methacrylic acid. Particularly preferably, the crosslinked polyacrylate may be a polyacrylate which is crosslinked by means of a compound V1 which is a di-, tri- or tetraester of polyacrylic acid or polymethacrylic acid which is obtained by reacting an alkoxylated polyol, in particular an ethoxylated polyol. in particular ethoxylated ethylene glycol, ethoxylated propylene glycol, ethoxylated trimethylolpropane, ethoxylated 1,6-hexanediol or ethoxylated glycerol, having an average number of ethylene oxide units n per hydroxyl group of n = 1 to 10 can be obtained with acrylic acid or methacrylic acid. Further, as compounds V1, polyvinyl compounds, polyallyl compounds, polymethylallyl compounds, acrylic acid esters or methacrylic acid esters of a monovinyl compound, acrylic acid esters or methacrylic acid esters of a monoallyl compound or monomethylallyl compound, preferably monoallyl compounds or monomethylallyl compounds of a polyol or an aminoalcohol are preferable. In this context is on DE 195 43 366 . DE 195 43 368 directed.

Überraschenderweise wird die oben aufgeführte Aufgabe auch durch Metallo-Proteasen-Inhibitoren aus der Gruppe der Polyacrylat-Superabsorber gelöst. Hierbei wird im Rahmen der vorliegenden Erfindung unter einem Polyacrylat-Superabsorber ein Polyacrylat mit den oben aufgeführten Merkmalen verstanden, das in der Lage ist, mindestens das 15-fache seines Eigengewichtes an physiologischer Kochsalzlösung (0,9%-ige NaCl-Lösung, Wasser) zu absorbieren. Damit betrifft die vorliegende Erfindung auch die Verwendung eines Metallo-Proteasen-Inhibitors aus der Gruppe der Polyacrylat-Superabsorber zur Herstellung eines Mittels zur Behandlung von chronischen Wunden.Surprisingly becomes the above listed Task also by metallo-protease inhibitors from the group of polyacrylate superabsorbers solved. This is in the context of the present invention under a polyacrylate superabsorbent a polyacrylate understood with the features listed above, which is able to physiologically at least 15 times its own weight Saline (0.9% NaCl solution, water) to absorb. Thus, the present invention also relates to Use of a metallo-protease inhibitor from the group of Polyacrylate superabsorbent for the preparation of an agent for the treatment of chronic wounds.

Superabsorber sind in der modernen Wundbehandlung lange Zeit bekannt. Diese werden jedoch lediglich als Wundflüssigkeit aufsaugendes Medium verwendet. Werden diese Superabsorber in dieser Art und Weise eingesetzt, wird einzig und allein der Flüssigkeitshaushalt der Wunde oder des Wundbetts reguliert. Überraschenderweise wurde daher festgestellt, dass Polyacrylat-Superabsorber in der Lage sind Metallo-Proteasen zu inhibieren und damit eine Wundheilung aktiv zu fördern. Insbesondere hat sich auch gezeigt, dass Polyacrylate-Superabsorber, insbesondere vernetzte Polyacrylat- Superabsorber Matrix-Metallo-Proteasen inaktivieren. Damit wird die Aufgabe in bevorzugter Weise von Matrix-Metallo-Proteasen-Inhibitoren gelöst. Besonders bevorzugt sind dabei Matrix-Metallo-Proteasen-Inhibitoren ausgewählt aus der Gruppe der Polyacrylat-Superabsorber und insbesondere aus der Gruppe der vernetzten Polyacrylat-Superabsorber.Superabsorbents have long been known in modern wound care. However, these are used only as a wound fluid absorbing medium. When these superabsorbents are used in this manner, only the fluid balance of the wound or wound bed is regulated. Surprisingly, it has therefore been found that polyacrylate superabsorbents are able to inhibit metallo proteases and thus actively promote wound healing. In particular, it has also been found that polyacrylate superabsorbers, in particular crosslinked polyacrylate superabsorbers, inactivate matrix metalloproteases. Thus, the object is achieved in a preferred manner of matrix metallo-protease inhibitors. Particularly preferred are matrix metallo-protease inhibitors selected from the group of polyacrylate superabsorbents and in particular from the group of crosslinked polyacrylate superabsorbents.

In jedem Fall kann der Polyacrylat-Superabsorber in Form von Fasern, Partikeln oder Gelen vorliegen. Dabei kann der Polyacrylat-Superabsorber in trockener oder in bereits gequollener Form vorliegen. In gequollener Form liegt das Polymer in gelförmigen, diskreten Fasern oder Partikeln vor. Dabei kann ein erfindungsgemäßer Metallo-Proteasen-Inhibitor aus der Gruppe der Polyacrylat-Superabsorber in Form von Partikeln vorliegen, die mit Wasser, physiologischer Kochsalz-Lösung oder Ringer-Lösung versetzt sind, wobei die Partikel bereits in gequollener Form vorliegen.In In any case, the polyacrylate superabsorbent may be in the form of fibers, Particles or gels are present. In this case, the polyacrylate superabsorbent in dry or already swollen form. In swollen Form the polymer is in gel, discrete fibers or particles. In this case, an inventive metallo-protease inhibitor from the group of polyacrylate superabsorbents in the form of particles, which is mixed with water, physiological saline solution or Ringer's solution are, wherein the particles are already present in swollen form.

Dabei zeigten sich zudem Polyacrylat-Superabsorber und insbesondere vernetzte Polyacrylat-Superabsorber als besonders bevorzugt, die als Partikel vorliegen und eine Partikelgrößenverteilung aufweisen, deren Anteil an Partikel zwischen 850 μm und 300 μm mindestens 55%, insbesondere mindestens 65% und ganz besonders mindestens 70% beträgt (gemessen nach EDANA 420.2-02). Insbesondere sind auch superabsorbierende Polyacrylate bevorzugt, deren Partikelanteil an Partikeln kleiner als 850 μm mindestens 85%, besonders mindestens 90% und ganz besonders mindestens 95% bezogen auf alle Partikel beträgt (gemessen nach EDANA 420.2-02).there In addition, polyacrylate superabsorbents and in particular crosslinked ones were found Polyacrylate superabsorbents which are particularly preferred as particles present and a particle size distribution whose proportion of particles between 850 microns and 300 microns at least 55%, in particular at least 65% and especially at least 70% is (measured according to EDANA 420.2-02). In particular, are also superabsorbent Polyacrylates are preferred whose particle content of particles smaller as 850 μm at least 85%, especially at least 90% and especially at least 95% based on all particles is (measured according to EDANA 420.2-02).

Überraschenderweise wird die oben aufgeführte Aufgabe insbesondere durch Matrix-Metallo-Proteasen-Inhibitoren aus der Gruppe der Polyacrylate insbesondere der vernetzen und/oder quervernetzten Polyacrylate gelöst. Als Polyacrylate sind hierbei Polyacrylate mit den oben beschriebenen Merkmalen zu verstehen. Damit betrifft die vorliegende Erfindung auch die Verwendung eines Matrix-Metallo-Proteasen-Inhibitors aus der Gruppe der Polyacrylate, insbesondere der vernetzten und/oder quervernetzten Polyacrylate zur Herstellung eines Mittels zur Behandlung von chronischen Wunden.Surprisingly becomes the above listed Task in particular by matrix metallo-protease inhibitors from the Group of polyacrylates in particular of the crosslinked and / or crosslinked Polyacrylates dissolved. As polyacrylates here are polyacrylates with those described above To understand characteristics. Thus, the present invention relates also the use of a matrix metallo-protease inhibitor the group of polyacrylates, in particular the crosslinked and / or cross-linked polyacrylates for the preparation of an agent for treatment from chronic wounds.

Chronische Wunden können definiert werden als Wunden, deren Heilungsverlauf in einem oder allen Stadien der Wundheilung von der normalen Wundheilung abweichen. So kann aus akuten Wunden z.B. durch eine Wundinfektion eine chronische Wunde entstehen, die durch eine verzögerte Heilungsgeschwindigkeit gekennzeichnet ist. Der Übergang von einer akuten zu einer chronischen Wunde kann dabei in jedem Stadium der Wundheilung erfolgen. Klinisch werden chronische Wunden definiert als Wunden, deren Heilung mehr als 6–8 Wochen benötigen, wobei diese Definition nicht alle Krankheitsbilder korrekt abdeckt. Es handelt sich bei chronischen Wunden mehr um eine Diagnose, die sich auf die klinische Erfahrung des medizinischen Personals stützt.chronic Sores can be defined as wounds, their healing process in one or differ from normal wound healing at all stages of wound healing. Thus, from acute wounds, e.g. by a wound infection a chronic Wound caused by a delayed healing rate is marked. The transition from an acute to a chronic wound can be present in everyone Stage of wound healing done. Clinically, chronic wounds defined as wounds whose healing takes more than 6-8 weeks, where this definition does not cover all clinical pictures correctly. It Chronic wounds are more of a diagnosis than themselves based on the clinical experience of the medical staff.

Chronische Wunden entstehen insbesondere aufgrund einer mechanischen Belastung (Dekubitus, Druck-Ulzera, Druckgeschwür), einer venösen Insuffizienz (Ulcus cruris venosum, venöse Ulzera), einer artheriosklerotischen Gefäßveränderung (Ulcus cruris arteriosum, arterielle Ulzera), einer neuropathischen Veränderungen (diabetisches Fußsyndrom, neuropathische Ulzera), aber auch in Folge von Autoimmunerkrankungen, von Tumoren (exulzierende Tumore) oder Strahlenschäden bei der Tumortherapie.chronic Wounds arise in particular due to mechanical stress (Pressure sores, pressure ulcers, pressure sores), venous insufficiency (Ulcus cruris venosum, venous Ulzera), an arteriosclerotic vessel change (Ulcus cruris arteriosum, arterial ulcers), a neuropathic change (diabetic foot syndrome, neuropathic ulcers), but also as a result of autoimmune diseases, tumors (exulsive tumors) or radiation damage the tumor therapy.

Der Dekubitus ist definiert als durch äußere (längerfristige) Druckeinwirkung mit Kompression von Gefäßen und lokaler Ischämie hervorgerufene trophische Störung von Geweben (v. a. Haut und Unterhautgewebe) mit Nekrose, Mazeration, evtl. Infektion. Dekubitalulcera entstehen vor allem bei Bettlägerigkeit, insbesondere an Körperstellen, an denen die Haut dem Knochen unmittelbar anliegt, aber auch z.B. unter schlecht sitzenden Prothesen und zu engen Gipsverbänden.Of the Pressure ulcers are defined as external (longer-term) pressure with compression of vessels and local ischemia caused trophic disorder of tissues (especially skin and subcutaneous tissue) with necrosis, maceration, possibly infection. Decubital ulcers occur mainly with bed rest, especially at body parts, where the skin is in direct contact with the bone but also e.g. under badly fitting dentures and too narrow plaster casts.

Der Dekubitus wird in folgende Stadien eingeteilt. Hierbei sind als chronische Wunden insbesondere Dekubita der Stufe II, Stufe III und Stufe IV bekannt:

– Dekubitus – Stufe I: Hierbei handelt es sich um eine persistierende, umschriebene Hautrötung, die auch bei Entlastung bestehen bleibt. Die Rötung ist scharf umgrenzt und kann verhärten oder überwärmt sein. Die Haut ist noch intakt.
– Dekubitus – Stufe II: In dieser Phase kommt es zu Blasenbildung und Hautabschürfung und damit zu Teilverlust der Haut. Die Epidermis bis hin zu Anteilen der Dermis ist geschädigt. In dieser Phase liegt eine oberflächige Wunde oder flaches Geschwür vor.
– Dekubitus – Stufe III: In diesem fortgeschrittenen Stadium ist bereits ein Verlust aller Hautschichten zu beobachten. Darüber hinaus sind eine Schädigung der subkutanen Gewebe und eventuell Nekrosen zu beobachten, die bis auf das darunter liegende Muskelgewebe reichen können. Erfahrungsgemäß muss es erst zu einer Abgrenzung des nekrotischen Gewebes kommen bis das ganze Ausmaß des Gewebeschadens erkennbar wird. Der Dekubitus III zeigt sich klinisch als offenes, tiefes Geschwür.
– Dekubitus – Stufe IV: In diesem äußerst kritischen Stadium ist ein Verlust aller Hautschichten mit ausgedehnter Zerstörung, Gewebsnekrose oder Schädigung von Muskeln, Knochen oder unterstützenden Strukturen (Sehnen, Gelenkkapseln) zu verzeichnen. Der Dekubitus IV zeigt sich klinisch als großflächiges, offenes und tiefes Geschwür.

The decubitus ulcer is divided into the following stages. Deco Stages Stage II, Stage III and Stage IV are known as chronic wounds in particular:

- Pressure ulcers - Level I: This is a persistent, circumscribed reddening of the skin, which persists even with relief. The redness is sharply circumscribed and may be hardened or overheated. The skin is still intact.
- Pressure ulcers - Stage II: In this phase, blistering and abrasion of the skin occurs and thus partial loss of the skin. The epidermis to the parts of the dermis is damaged. At this stage there is a superficial wound or flat ulcer.
- Pressure ulcers - Stage III: At this advanced stage, a loss of all layers of the skin is already observed. In addition, damage to the subcutaneous tissue and possibly necroses to be care that can reach down to the underlying muscle tissue. Experience has shown that it is necessary to delineate the necrotic tissue until the entire extent of the tissue damage becomes apparent. The pressure ulcer III shows clinically as an open, deep ulcer.
- Pressure ulcers - Stage IV: At this critical stage, all layers of the skin are at risk of extensive destruction, tissue necrosis or damage to muscle, bone or supporting structures (tendons, joint capsules). The pressure ulcer IV shows clinically as a large, open and deep ulcer.

Gemäß einem weiterführenden Gedanken der vorliegenden Erfindung, ist auch eine Wundauflage umfassend einen Metallo-Protease-Inhibitor oder einen Matrix-Metallo-Protease-Inhibitor ausgewählt aus der Gruppe Polyacrylate oder der vernetzten Polyacrylate Gegenstand der vorliegenden Erfindung. Insbesondere ist auch eine Wundauflage umfassend einen Metallo-Protease-Inhibitor, insbesondere Matrix-Metallo-Protease-Inhibitor ausgewählt aus der Gruppe Polyacrylat, insbesondere der vernetzten Polyacrylate Gegenstand der vorliegenden Erfindung. Hierbei kann der Inhibitor in fester Form als Partikel oder in vorgequollener, gelförmiger Form auf ein Trägermaterial, insbesondere ein Fasermaterial auf- oder eingebracht sein.According to one secondary Thought of the present invention is also encompassing a wound dressing a metallo-protease inhibitor or a matrix metallo-protease inhibitor selected from the group of polyacrylates or the crosslinked polyacrylates subject of the present invention. In particular, there is also a wound dressing comprising a metallo-protease inhibitor, in particular matrix metallo-protease inhibitor selected from the group polyacrylate, in particular the crosslinked polyacrylates Subject of the present invention. Here, the inhibitor in solid form as particles or in pre-swollen, gel-like form on a carrier material, in particular a fiber material or be incorporated.

Damit ist auch die Verwendung einer Wundauflage umfassend ein Trägermaterial, insbesondere ein Fasermaterial, und einen Metallo-Protease-Inhibitor, insbesondere einen Matrix-Metallo-Protease-Inhibitor ausgewählt aus der Gruppe der Polyacrylate, insbesondere der vernetzten Polyacrylate, zur Herstellung eines Mittels zur Behandlung von chronischen Wunden Gegenstand der vorliegenden Erfindung.In order to is also the use of a wound dressing comprising a carrier material, in particular a fiber material, and a metallo-protease inhibitor, in particular a matrix metallo-protease inhibitor selected from the group of polyacrylates, in particular the crosslinked polyacrylates, for the preparation of an agent for the treatment of chronic wounds Subject of the present invention.

Alternativ kann die Wundauflage auch ein Polyacrylat, ein vernetzes Polyacrylat oder einen Polyacrylat-Superabsorber und ein hydrophiles Fasermaterial umfassen. Hierbei können als hydrophiles Fasermaterial insbesondere wasserunlösliche Fasern aus Cellulose, insbesondere weitgehend delignifizierte technische Zellstofffasern, insbesondere Holzzellstofffasern, insbesondere einer Faserlänge von < 5mm Verwendung finden. Das Fasermaterial kann auch hydrophiles Fasermaterial aus regenerierter Cellulose, Carboxymethylcellulose, Carboxyethylcellulose, Hydroxymethylcellulose oder Hydroxyethylcellulose enthalten. Es kann auch vorgesehen sein eine Fasermischung aus Cellulose-, regenerierter Cellulose, Carboxymethylcellulose-, Carboxyethylcellulose-, Hydroxymethylcellulose- oder Hydroxyethylcellulose-Fasern und Fasern aus Polyethylen, Polypropylen oder Polyester vorzusehen. In einer ganz besonders bevorzugten Ausführungsform umfasst die Wundauflage eine Mischung aus Cellulosefasern, Polypropylenfasern und einen partikelförmigen, vernetzten Polyacrylat-Superabsorber.alternative The wound dressing may also be a polyacrylate, a crosslinked polyacrylate or a polyacrylate superabsorbent and a hydrophilic fiber material include. Here you can as hydrophilic fiber material, in particular water-insoluble fibers of cellulose, in particular largely delignified technical pulp fibers, in particular wood pulp fibers, in particular a fiber length of <5 mm use Find. The fiber material can also be made of hydrophilic fiber material regenerated cellulose, carboxymethylcellulose, carboxyethylcellulose, Hydroxymethylcellulose or hydroxyethylcellulose. It can also be provided a fiber mixture of cellulose, regenerated Cellulose, carboxymethylcellulose, carboxyethylcellulose, hydroxymethylcellulose or hydroxyethylcellulose fibers and fibers of polyethylene, polypropylene or polyester. In a most preferred embodiment For example, the wound dressing comprises a mixture of cellulosic fibers, polypropylene fibers and a particulate, crosslinked polyacrylate superabsorbent.

Eine erfindungsgemäße Wundauflage ist insbesondere zur Behandlung von vergleichsweise tiefen chronischen Wunden geeignet. So lassen sich beispielsweise tiefe dermale Ulzera behandeln, die sehr häufig stark nässend sind. Darüber hinaus können mit einer vorliegenden Wundauflage aber auch trockene Wunden wie beispielsweise trockener Ulcus cruris behandelt werden. Hierbei zeigt die Wundauflage seine Fähigkeit, der Wunde Flüssigkeit zuzuführen und gleichzeitig unerwünschten Substanzen, Belägen und Nekrosen durch eine schonende Debridierung zu gewährleisten. Unterstützt wird der Wundheilungsprozess durch einen semi-occlusiven Abschluss mittels eines sekundären Wundverbandes wie beispielsweise eines Filmverbandes, wodurch unerwünschte Kontaminationen verhindert werden. Andere Kategorien von Wunden, für die die Wundauflage angewendet werden kann, umfassen ohne darauf beschränkt zu sein Dekubitus Stufe II, III, IV (Druckgeschwür), Ulcus cruris (Unterschenkelgeschwür, offenes Bein), diabetisches Fußsyndrom, insbesondere chronische Formen dieser Wunden. Damit betrifft die vorliegende Erfindung auch die Verwendung einer Wundauflage umfassend einen Matrix-Metallo-Proteasen-Inhibitor aus der Gruppe der Polyacrylat-Superabsorber zur Herstellung eines Mittels zur Wundheilung, insbesondere zur Behandlung von Dekubitus Stufe II, III, IV (Druckgeschwür) oder Ulcus cruris (Unterschenkelgeschwür, offenes Bein) oder diabetisches Fußsyndrom, insbesondere chronische Formen dieser Wunden.A wound dressing according to the invention is especially for the treatment of relatively deep chronic Suitable for wounds. Thus, for example, deep dermal ulcers treat that very often strong exuding are. About that can out with a wound dressing but also dry wounds like For example, dry leg ulcers are treated. in this connection The wound dressing shows its ability to Wound fluid supply and at the same time undesirable Substances, coverings and to ensure necrosis by gentle debridement. supports The wound healing process is characterized by a semi-occlusive closure by means of a secondary Wound dressing such as a film dressing, causing unwanted contamination be prevented. Other categories of wounds for which the wound dressing can be applied to, but not limited to Decubitus stage II, III, IV (pressure ulcer), ulcus cruris (lower leg ulcer, open Leg), diabetic foot syndrome, especially chronic forms of these wounds. This concerns the present invention also encompasses the use of a wound dressing a matrix metallo-protease inhibitor from the group of polyacrylate superabsorbents for the preparation of a wound healing agent, in particular for Treatment of decubitus stage II, III, IV (pressure ulcer) or Ulcus cruris (lower leg, open leg) or diabetic foot syndrome, especially chronic forms of these wounds.

Im Folgenden soll die Wirksamkeit der Polyacrylate anhand von einigen Testungen dargestellt werden. Mit den Figuren sind folgende Zusammenhänge näher erläutert:in the The following is the effectiveness of the polyacrylates based on some Tests are presented. The following relationships are explained in more detail with the figures:

1: Inhibition von MMP-Aktivität im Wundexsudat durch ein Polyacrylat 1 : Inhibition of MMP Activity in Wound Exudate by a Polyacrylate

2: Inhibition der MMP-Aktivität durch direkte Bindung an ein Polyacrylat 2 : Inhibition of MMP Activity by Direct Binding to a Polyacrylate

3: Inhibition von MMP-Aktivität ohne direkte Bindung an ein Polyacrylat Stellvertretend für biologische Flüssigkeiten einschließlich Exkrementen wird Wundexsudat im Folgenden behandelt. Wundexsudat mit hoher Proteaseaktivität wurde von Patienten mit chronischen Wunden gewonnen und mit Flüssigkeit voraktivierten Polyacrylaten für 2 Stunden bei Raumtemperatur inkubiert. 3 : Inhibition of MMP Activity Without Direct Binding to a Polyacrylate Representative of biological fluids including excrement, wound exudate is discussed below. Wound exudate with high protease activity was recovered from patients with chronic wounds and incubated with liquid pre-activated polyacrylates for 2 hours at room temperature.

Im folgenden Beispiel erfolgte die Voraktivierung durch Mischung von 0,2 g vernetztem Polyacrylat (Favor Z3034, Fa. Stockhausen, Krefeld – Deutschland) mit 36,94 ml Ringerlösung (8,6 g NaCl, 0,3 g KCl, 0,33 g CaCl₂·2 H₂O ad 1000 ml Wasser), wobei die Mischung für 24 Stunden in einem abgeschlossenen Gefäß stehen gelassen wird. 100 μg Wundflüssigkeitsprotein einer chronischen Wunde (Ulcus cruris) mit erhöhter Metallo-Proteasen-Aktivität wurde mit Ringerlösung auf 150 μl verdünnt und mit dem gleichen Volumen voraktiviertem Polyacrylat versetzt, wobei näherungsweise die Masse des voraktivierten Polyacrylat-Superabsorber dem Volumen gleichgesetzt werden kann (Anmerkung: Wundflüssigkeit enthält je nach Patient unterschiedliche Konzentrationen an Protein. Für jede Untersuchung wurde der Gehalt an Protein in der jeweiligen Wundflüssigkeit bestimmt und davon ein Aliquot 100 μg Protein entnommen und mit Ringerlösung auf 150 μl aufgefüllt). Nach der Inkubation wird der Überstand mittels eines Enzymsubstrats ((Gly-Pro-Hyp*)₅-Gly-Pro-Lys(Mca)-Gly-Pro-Pro-Gly↓Val-Val-Gly-Glu-Lys(Dnp)-Gly-Glu-Gln-(Gly-Pro-Hyp)₅-NH₂)*Hyp = 4-hydroxy-L-proline) für Metallo-Proteasen und fluoreszenzphotometrischer Messung auf das Vorliegen von Gelatinase-Enzymaktivität gegen einen Standard oder geeignete Kontrollen untersucht. Hierzu wurde ein kommerziell erhältliches Kit InnoZyme^® Gelatinase Activity Assay Kit (Katalog-Nr. CAB003, Fa. Calbiochem, San Diego – USA) verwendet. Abweichend von der Vorschrift des Herstellers wurde auf die Aktivierung des Enzyms durch APMA (p-aminophenylmercuric acetate) verzichtet, um die vorhandene MMP-Aktivität zu erfassen. Die modifizierte Vorschrift lautete:

– 90 μl Probe (Wundflüssigkeit, Polyacrylat-Superabsorber oder EDTA vorbehandelte Wundflüssigkeit) oder Standard (Standard wurde mit Aktivierungspuffer, der APMA enthielt) oder Kontrolle, die nur aus Aktivierungspuffer bestand, wurden mit 10 μl der fertigen Substratlösung (laut Vorschrift des Herstellers) versetzt.
– Die Mischung wurde bei 37 °C für 24 Stunden inkubiert.
– Die Fluoreszenz wurde bei einer Wellenlänge von 320 nm (Anregung) und 405 nm (Emission) gemessen und die Werte gegen den Standard aufgetragen.

In the following example, the pre-activation was carried out by mixing 0.2 g of crosslinked polyacrylate (Favor Z3034, Stockhausen Co., Krefeld - Germany) with 36.94 ml of Ringer's solution (8.6 g of NaCl, 0.3 g of KCl, 0.33 g CaCl ₂ · 2 H ₂ O ad 1000 ml water), wherein the mixture for 24 hours in a sealed vessel is left standing. 100 μg of wound fluid protein in a chronic wound (ulcus cruris) with increased metalloproteinase activity was diluted with Ringer's solution to 150 μl and admixed with the same volume of pre-activated polyacrylate, whereby the mass of the pre-activated polyacrylate superabsorber can be approximately equated to the volume (note: Wound fluid contains different concentrations of protein depending on the patient.For each examination, the protein content in the respective wound fluid was determined and an aliquot of 100 μg of protein was taken from it and made up to 150 μl with Ringer's solution). After incubation, the supernatant is purified by means of an enzyme substrate ((Gly-Pro-Hyp *) _5- Gly-Pro-Lys (Mca) -Gly-Pro-Pro-Gly ↓ Val-Val-Gly-Glu-Lys (Dnp) - Gly-Glu-Gln- (Gly-Pro-Hyp) ₅ -NH ₂ ) * Hyp = 4-hydroxy-L-proline) for metallo proteases and fluorescence photometric measurement for the presence of gelatinase enzyme activity against a standard or appropriate controls , For this purpose (. CAB003, from Calbiochem, San Diego Cat. - USA), a commercially available kit InnoZyme ^® gelatinase activity assay kit used. Contrary to the instructions of the manufacturer, the activation of the enzyme by APMA (p-aminophenylmercuric acetate) was dispensed with in order to detect the existing MMP activity. The modified rule was:

- 90 μl sample (wound fluid, polyacrylate superabsorber or EDTA pretreated wound fluid) or standard (standard was mixed with activation buffer containing APMA) or control consisting of activation buffer only was added with 10 μl of the final substrate solution (according to the manufacturer's instructions) ,
The mixture was incubated at 37 ° C for 24 hours.
The fluorescence was measured at a wavelength of 320 nm (excitation) and 405 nm (emission) and the values were plotted against the standard.

1 zeigt die Inhibition von MMP Aktivität im Wundexsudat durch ein Polyacrylat. Hierbei wurden 100 μg Wundexsudat-Protein (Wound Fluid) mit Ringerlösung auf 150 μl aufgefüllt und mit 150 μg mit Ringerlösung voraktiviertem Polyacrylat für 2 Stunden inkubiert. Danach wurde der Überstand mit dem MMP-Peptidsubstrat versetzt und die Enzymaktivität nach 24 Stunden Inkubation fluoreszenzphotometrisch gemessen. Als biologische Kontrollen wurde Wundflüssigkeit ohne Polyacrylat-Behandlung (als 100% gesetzt) und Wundflüssigkeit, deren MMP-Aktivität durch EDTA Zugabe (10 mM Endkonzentration) blockiert wurde, als Negativkontrolle herangezogen. 1 shows the inhibition of MMP activity in wound exudate by a polyacrylate. In this case, 100 μg of wound exudate protein (Wound Fluid) were filled up with Ringer's solution to 150 μl and incubated with 150 μg of Ringer's solution pre-activated polyacrylate for 2 hours. Thereafter, the supernatant was spiked with the MMP peptide substrate, and the enzyme activity was measured fluorescence photometrically after incubation for 24 hours. As biological controls wound fluid without polyacrylate treatment (set at 100%) and wound fluid whose MMP activity was blocked by addition of EDTA (10 mM final concentration) were used as a negative control.

Hierbei wurden die Polyacrylat-behandelten Wundflüssigkeiten gegen unbehandelte Wundflüssigkeit des gleichen Patienten (Kontrolle) gemessen, die als 100% Enzymaktivität gesetzt wurden. Die Aktivität der Polyacrylat-behandelten Wundflüssigkeiten erreichte nach Messung Werte, die deutlich unter den Werten der Kontrolle lagen. Die Inhibition mit 10 mM EDTA, einem starken Inhibitor der Metalloproteasen, konnte die Restaktivität der Polyacrylat-behandelten Wundflüssigkeiten nur noch um wenige Prozentpunkte hemmen (1). Diese Versuche wurden mit Wundflüssigkeit verschiedener Patienten reproduziert.Here, the polyacrylate-treated wound fluids were measured against untreated wound fluid of the same patient (control), which was set as 100% enzyme activity. The activity of the polyacrylate-treated wound fluids, when measured, reached values well below the values of the control. The inhibition with 10 mM EDTA, a strong inhibitor of the metalloproteases, was only able to inhibit the residual activity of the polyacrylate-treated wound fluids by a few percentage points (US Pat. 1 ). These experiments were reproduced with wound fluid from different patients.

Anschließend wurde analysiert, ob MMP-Aktivität aus Wundflüssigkeit an Polyacrylat bindet. Wundsekret chronischer Wunden wurde analog den obigen Experimenten mit Polyacrylat für 2 Stunden inkubiert. Danach wurde der Überstand abgenommen und mit dem gleichen Volumen 2x SDS-Gel Probenpufter (siehe unten) versetzt, bei 95 °C für 10 Minuten im Wasserbad aufgekocht und anschließend bis zu seiner Verwendung bei –20 °C gelagert. Der so behandelte Polyacrylat-Superabsorber wurde nach der Inkubation 3x mit einem Überschuss (5 w/w) Waschpuffer (10g Bovine Serum Albumin (Sigma A-2153), 8,6 g NaCl, 0,3 g KCl, 0,33 g CaCl₂·2 H₂O ad 1000 ml Wasser) gewaschen. Das so behandelte Polyacrylat wurde mit 1 Volumen (v/w) 2x SDS-Gel Probenpuffer versetzt, bei 95 °C für 10 Minuten im Wasserbad aufgekocht und anschließend bei –20 °C gelagert oder direkt der Gelatine-Zymographie unterzogen. Dazu wurde ein Aliquot der Wundflüssigkeit, des mit Polyacrylat behandelten Überstandes and der Polyacrylat gebundenen Proteine auf ein Gelatine enthaltendes SDS Gel aufgetragen und elektrophoretisch aufgetrennt.It was then analyzed whether MMP activity from wound fluid binds to polyacrylate. Wound secretion of chronic wounds was incubated with polyacrylate for 2 hours analogously to the above experiments. Thereafter, the supernatant was removed and mixed with the same volume 2x SDS gel sample buffer (see below), boiled at 95 ° C for 10 minutes in a water bath and then stored at -20 ° C until its use. The polyacrylate superabsorber thus treated was incubated 3x with an excess (5 w / w) wash buffer (10g bovine serum albumin (Sigma A-2153), 8.6g NaCl, 0.3g KCl, 0.33g CaCl ₂ x 2 H ₂ O to 1000 ml of water). The thus treated polyacrylate was mixed with 1 volume (v / w) 2x SDS-gel sample buffer, boiled at 95 ° C for 10 minutes in a water bath and then stored at -20 ° C or directly subjected to gelatin zymography. For this purpose, an aliquot of the wound fluid, the polyacrylate-treated supernatant and the polyacrylate-bound proteins were applied to a gelatin-containing SDS gel and separated by electrophoresis.

Diese Technik ist äußerst sensitiv und basiert auf einer Auftrennung der Proteasen in einem SDS-Gel, welches gleichzeitig ein Proteasesubstrat (Gelatine) enthält.These Technology is extremely sensitive and based on a separation of the proteases in an SDS gel, which simultaneously contains a protease substrate (gelatin).

Das Gel setzt sich zusammen aus (alle Chemikalien Fa. Sigma-Aldrich Chemie GmbH, 89555 Steinheim – Deutschland):

– 3,3 ml Gelatinelösung (Gelatine, porcine skin (CAS-Nr. 9000-70-8), 3 mg/ml H₂O),
– 0,85 ml destilliertes H₂O,
– 2,5 ml 1,5M Tris (Tris(hydroxymethyl)aminomethan)/HCl/0,4% SDS-Lösung (Sodiumdodecylsulfat-Lösung), pH 8,8,
– 3,35 ml 30% Acrylamid/0,8% Bisacrylamid Lösung,
– 50 μl (10%, w/v) Ammoniumpersulfat und
– 5 μl TEMED (N,N,N',N'-Tetramethylendiamin); das Obergel entspricht
– 3,075 ml destilliertes H₂O,
– 0,625 ml 0,5M Tris (Tris(hydroxymethyl)aminomethan)/HCl/0,4% SDS-Lösung (Sodiumdodecylsulfat-Lösung), pH 6.8,
– 0,75 ml 30% Acrylamid/0,8% Bisacrylamid Lösung,
– 50 μl (10%, w/v) Ammoniumpersulfat und
– 5 μl TEMED (N,N,N',N'-Tetramethylendiamin)

The gel is composed of (all chemicals Fa. Sigma-Aldrich Chemie GmbH, 89555 Steinheim - Germany):

- 3.3 ml gelatin solution (gelatin, porcine skin (CAS No 9000-70-8), 3 mg / ml H ₂ O),
0.85 ml of distilled H ₂ O,
2.5 ml of 1.5M Tris (tris (hydroxymethyl) aminomethane) / HCl / 0.4% SDS solution (sodium dodecylsulfate sol solution), pH 8.8,
3.35 ml of 30% acrylamide / 0.8% bisacrylamide solution,
50 μl (10%, w / v) ammonium persulfate and
5 μl of TEMED (N, N, N ', N'-tetramethylenediamine); the Obergel corresponds
3.075 ml of distilled H ₂ O,
0.625 ml of 0.5M Tris (tris (hydroxymethyl) aminomethane) / HCl / 0.4% SDS solution (sodium dodecyl sulfate solution), pH 6.8,
0.75 ml of 30% acrylamide / 0.8% bisacrylamide solution,
50 μl (10%, w / v) ammonium persulfate and
5 μl of TEMED (N, N, N ', N'-tetramethylenediamine)

Die Gele können als so genannte Minigele oder in anderen Apparaturen als konventionelle Zymogramme zur Auftrennung des Proteingemisches verwendet werden. Dem Fachmann sind dies Apparaturen und Methoden bekannt.The Gels can as so-called minigels or in other equipment than conventional ones Zymograms can be used to separate the protein mixture. The person skilled in this apparatus and methods are known.

Der Probenauftragspuffer kann ein beliebiger Proteinauftragspuffer sein, der keine reduzierenden Substanzen erhalten darf. Nach der Auftrennung werden die Proteasen renaturiert (waschen für 2 × 15 Min. in 2,5% Triton-X-100 in H₂O, dann waschen für 2 × 15 Min. in 50 mM Tris/HCl pH 7,4; 5 mM CaCl₂) und für 24–48 Std. in dem letzten Waschpuffer inkubiert. Die renaturierten Metallo-Proteasen bauen das Gelatinesubstrat in ihrer unmittelbaren Nachbarschaft ab. Färbt man diese Zymogramme mit einem Proteinfarbstoff (Coomassie CAS-Nr. 6104-59-2, Fa. Sigma-Aldrich Chemie GmbH, 89555 Steinheim – Deutschland), gefolgt von der Entfärbung nach Standardprotokollen, stellt sich die nicht abgebaute Gelatine homogen blau im Gel dar (in der Abbildung 2 grau/schwarz dargestellt). Nur an Stellen an denen sich proteolytische Aktivität befindet und die Gelatine abgebaut wurde, imponieren klare, durchsichtige Banden, sogenannte „Fressbanden" (in der Abbildung 2 weiß auf grauem/schwarzen Grund dargestellt). An Hand des typischen Musters und des durch einen Proteinmarker ermittelten Molekulargewichtbereichs (hier nicht dargestellt) konnte die Art des Enzyms bestimmt werden. Die hier beschriebene Methode und Variationen davon (z.B. Herron et al., J Biol Chem. 1986 261:2814-8) sind dem Fachmann geläufig.The sample application buffer may be any protein application buffer that is not allowed to receive reducing substances. After separation, the proteases are renatured (wash for 2 x 15 min in 2.5% Triton-X-100 in H ₂ O, then wash for 2 x 15 min in 50 mM Tris / HCl pH 7.4; 5 mM CaCl ₂ ) and incubated for 24-48 hr in the final wash buffer. The renatured metallo proteases degrade the gelatin substrate in their immediate vicinity. If these zymograms are stained with a protein dye (Coomassie CAS No. 6104-59-2, Sigma-Aldrich Chemie GmbH, 89555 Steinheim - Germany), followed by decolorization according to standard protocols, the undegraded gelatin turns homogeneous blue in the gel (in the picture 2 shown in gray / black). Only in places where proteolytic activity is and the gelatin was degraded, impress clear, transparent bands, so-called "feeding gangs" (in the figure 2 white on a gray / black background). On the basis of the typical pattern and determined by a protein marker molecular weight range (not shown here), the nature of the enzyme could be determined. The method described here and variations thereof (eg Herron et al., J Biol Chem. 1986 261: 2814-8) are familiar to the expert.

In diesen Experimenten war eine deutliche Bindung der MMP an dem Polyacrylat festzustellen. Einhergehend war eine Abreicherung der MMP-Aktivität in der mit Polyacrylat behandelten Wundflüssigkeit festzustellen. Die Bindung und Immobilisation am Polyacrylat kann als hochaffin angesehen werden, da sie trotz Waschschritten erhalten blieb. Die Resultate sind in 2 dargestellt, wobei in der ersten Kolonne (1) die MMP-2- und MMP-9-Aktivität in der unbehandelten Wundflüssigkeit dargestellt ist. In der zweiten und dritten Kolonne ist die Aktivität der mit dem oben genannten Polyacrylat behandelten Wundflüssigkeit derselben Wunde gezeigt. In der dritten Kolonne (3) sind die Aktivitäten der an das voraktivierte Polyacrylat gebundenen MMP aufgetragen (die MMP wurden durch Erwärmen im Auftragspuffer von dem Polyacrylat abgelöst), wogegen in der zweiten Kolonne (2) die Aktivität der im Überstand verbliebenen MMP gezeigt ist.In these experiments, a marked binding of the MMP to the polyacrylate was observed. As a result, depletion of MMP activity in the polyacrylate-treated wound fluid was noted. The binding and immobilization on the polyacrylate can be considered as high affinity since it was retained despite washing steps. The results are in 2 represented, wherein in the first column (1) the MMP-2 and MMP-9 activity is shown in the untreated wound fluid. In the second and third columns, the activity of the wound fluid of the same wound treated with the above-mentioned polyacrylate is shown. In the third column (3), the activities of the MMP bound to the preactivated polyacrylate are plotted (the MMPs were removed from the polyacrylate by heating in the loading buffer) whereas in the second column (2) the activity of the MMP remaining in the supernatant is shown.

Schließlich wurde untersucht, ob Polyacrylat auch ohne direkten Kontakt die MMP-Aktivität inhibieren kann. Dazu wurde Wundflüssigkeit mit hoher MMP-Aktivität in einem Gelatine-Zymographie Gel dreimal nebeneinander mit Marker aufgetragen und elektrophoretisch aufgetrennt. Das Gelatine-Zymogramm wurde in drei Teile (jeweils Marker und Wundflüssigkeit-Protein enthaltend) geschnitten und der erste Teil entsprechend der Standardvorschrift renaturiert und entwickelt. Der zweite Teil wurde identisch behandelt, nur dass dem Entwicklungspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7,4, 5 mM CaCl₂) während der Entwicklung mit Ringerlösung-voraktivierter Polyacrylat zugegeben wurde (15 g Ringerlösung-voraktiviertes Polyacrylat/30 ml Entwicklungspuffer). Der dritte Teil wurde in Gegenwart von 50 mM EDTA (Endkonzentration) im Entwicklungspuffer entwickelt. Die drei Zymogrammteile wurden gemeinsam gefärbt und die MMP-Aktivität anhand der klaren Banden bewertet, wobei das Zymogramm (1) die positive Kontrolle, die Aktivität von MMP-2 und MMP-9 ohne Behandlung mit oben genanntem Polyacrylat, Zymogramm (2) die Aktivität der MMP aus mit Polyacrylat behandeltem Wundsekret (der nicht von dem Polyacrylat gebundene Anteil) und im Zymogramm (3) die Aktivität der MMP aus mit EDTA behandeltem Wundflüssigkeit gezeigt ist (vgl. 3). In 3 zeigt eine klare Hemmung der MMP-Aktivität in dem mit Ringerlösung-voraktivierter Polyacrylat Gelteil. EDTA, ein bekannter Hemmstoff der MMP-Aktivität, hat, wie erwartet, die MMP-Aktivität in diesen Experimenten komplett blockiert.Finally, it was investigated whether polyacrylate can inhibit MMP activity even without direct contact. For this purpose, wound fluid with high MMP activity in a gelatin zymography gel was applied three times side by side with a marker and separated by electrophoresis. The gelatin zymogram was cut into three parts (each containing marker and wound fluid protein) and the first part was renatured and developed according to the standard procedure. The second part was treated identically except for the development buffer (50 mM Tris / HCl pH 7.4, 5 mM CaCl ₂ ) during development with Ringer's solution pre-activated polyacrylate (15 g of Ringer's solution pre-activated polyacrylate / 30 ml of development buffer). The third part was developed in the presence of 50 mM EDTA (final concentration) in development buffer. The three zymogram sections were stained together and the MMP activity was assessed on the clear bands, with the zymogram (1) the positive control, the activity of MMP-2 and MMP-9 without treatment with the above polyacrylate, zymogram (2) the activity MMP from wound exudate treated with polyacrylate (the portion not bound by the polyacrylate) and in the zymogram (3) the activity of MMP from wound fluid treated with EDTA (cf. 3 ). In 3 shows a clear inhibition of MMP activity in the Ringer's solution pre-activated polyacrylate gel portion. EDTA, a known inhibitor of MMP activity, has, as expected, completely blocked MMP activity in these experiments.

Die Experimente belegen eindeutig, dass Polyacrylate die MMP-Aktivität direkt durch Kompartimentierung aber auch durch Hemmung über eine Distanz stark und effektiv reduzieren. Im biologischen Kontext verschiebt sich das Verhältnis von Granulationsgewebeabbau durch exzessive MMP-Aktivität in chronischen Wunden und Granulationsgewebeaufbau im Rahmen der Wundheilung zugunsten des Aufbaus und einer verbesserten Heilung.The experiments clearly demonstrate that polyacrylates strongly and effectively reduce MMP activity directly by compartmentalization but also by inhibition over a distance. In the biological context, the ratio of granulation tissue degradation due to excessive MMP activity in chronic wounds and granulation tissue buildup shifts in the context of wound healing in favor of the structure and a ver improved healing.

Claims

Use of a metallo-protease inhibitor from the group of polyacrylates for the preparation of an agent for Treatment of chronic wounds.

Use according to claim 1, characterized the polyacrylate is a crosslinked and / or crosslinked polyacrylate is.

Use according to claim 1 or 2, characterized that the polyacrylate a) comprises a homopolymer derived from the Monomers M1 is and crosslinked by means of a crosslinker and / or is cross-linked and or b) a copolymer comprising consists of the monomers M1 and M3, wherein the monomer M1 is acrylic acid and / or a salt thereof and the monomer M3 from the group of crosslinkers chosen becomes.

Use according to at least one of the aforementioned Claims, characterized in that the polyacrylate is a polyacrylate superabsorber which is in the form of particles, fibers or a gel.

Metallo protease inhibitor selected from the group of polyacrylates.

Metallo-protease inhibitor according to claim 5, characterized characterized in that the polyacrylate is a crosslinked and / or crosslinked polyacrylate.

Metallo-protease inhibitor according to claim 5 or 6, characterized in that the polyacrylate a) a homopolymer which consists of the monomers M1 and by means of a crosslinking agent crosslinked and / or crosslinked and or b) a copolymer comprising the monomers M1 and M3, the Monomer M1 acrylic acid and / or a salt thereof and the monomer M3 is from the group the crosslinker chosen becomes.

Wound dressing comprising a metallo-protease inhibitor according to at least one of the preceding claims 5 to 7.

Wound dressing according to claim 8, characterized that the polyacrylate is a polyacrylate superabsorbent in the form of particles, fibers or a gel.

Wound dressing according to at least one of claims 8 or 9, characterized in that the wound dressing further comprises a carrier material in particular comprises a fiber material.

Use of a wound dressing after at least one the claims 8 to 10, for the preparation of an agent for the treatment of chronic Wounds.