CN101389597A

CN101389597A - 苯丙醇抗生素的碳酸酯

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Publication number: CN101389597A
Application number: CNA2006800534854A
Authority: CN
Inventors: T·W·葛林卡; D·E·史崔特; C·S·西利; R·D·赛门斯; 章傑森
Original assignee: Schering Plough Ltd
Current assignee: MSD International Holdings GmbH
Priority date: 2005-12-29
Filing date: 2006-12-20
Publication date: 2009-03-18
Also published as: ECSP088582A; UA96285C2; ZA200805673B

Abstract

本发明涉及式I和II苯丙醇化合物的碳酸酯衍生物，其中变量定义同权利要求书，这些衍生物具有抗生素前药的有用性质；以及制备和使用这些化合物的方法。

Description

苯丙醇抗生素的碳酸酯

发明领域

本发明涉及苯丙醇(fenicol)化合物的碳酸酯前药，该前药在合适的溶剂载体中具有提高的溶解度和减少的粘度。

发明背景

氯霉素(Chloramphenical)、甲砜霉素和氟苯尼考是通称为“苯丙醇类”的广谱抗生素。氟苯尼考是广谱抗生素，它具有抗多种革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的活性。氟苯尼考可在哺乳动物、鸟、爬行动物、鱼和甲壳类动物中用于预防和治疗敏感病原体引起的细菌感染。其主要用途之一是治疗由曼氏溶血杆菌(Mannhemia haemolytica)、多沙巴斯德菌(Pasteurella multocida)和(或)睡眠嗜组织菌(Histophilus somni)造成的牛肺炎和有关呼吸感染(通常通称为牛呼吸疾病或BRD)。由坏死梭杆菌(Fusobacterium necrophorum)和/或产黑色素普雷沃菌(Prevotella melaninogenicus)造成的传染性牛蹄皮炎、由多沙巴斯德菌(Pasteurella multocida)、大叶性肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae)、猪链球菌(Streptococcus suis)、猪霍乱沙门菌(Salmonella cholerasuis)和(或)支原体属(Mycoplasma spp.)造成的猪呼吸疾病、由大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli)造成的鸡大肠杆菌病、由Edwardsiella ictaluri造成的鲶鱼肠败血症和由杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)造成的鲑鱼疳病也是其治疗适应症。对氟苯尼考具有证明的敏感性的其它细菌属包括肠杆菌属(Enterobacter)、克雷伯杆菌属(Klebsiella)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、肠道球菌属(Enterococcus)、博代杆菌属(Bordetella)、变形杆菌属(Proteus)和志贺菌属(Shigella)。尤其是，对氯霉素耐药的生物株例如肺炎克雷白杆菌(K.pneumoniae)、阴沟肠杆菌(E.cloacae)、伤寒沙门氏菌(S.typhus)和大肠埃希氏杆菌(E.coli)对氟苯尼考敏感。

如下所示，氟苯尼考是甲砜霉素的结构类似物，而甲砜霉素又是氯霉素的衍生物，其中涉及氯霉素诱导的、非剂量相关的不可逆人再生障碍性贫血的芳族硝基被甲磺酰基置换。

氯霉素甲砜霉素氟苯尼考

氟苯尼考具有代替氯霉素和甲砜霉素的伯羟基的氟原子。因此致使氟苯尼考对含质粒编码酶、氯霉素乙酰转移酶(CAT)的细菌的失活作用不很敏感，乙酰转移酶使氯霉素和甲砜霉素的伯羟基乙酰化。该乙酰化阻止这些抗生素与敏感菌的核糖体亚基结合。此类抗生素与核糖体亚基的结合是氯霉素和甲砜霉素抑制肽基转移酶主要(但不是唯一的)的作用机制，肽基转移酶负责在细菌中将氨基酸转运至生长肽链，然后形成蛋白质。

最通常通过口服、皮下或肠胃外给予可由其优点受益的患者氟苯尼考，肠胃外主要是肌内或静脉内。如果在兽医环境中需要经济的单剂量治疗，仍然需要新的高浓度氟苯尼考制剂。

另外，还需要能够长时间维持有效血浆抗生素水平的氟苯尼考形式，以便达到改善的给药节约效果，例如更易提供单剂量治疗，尤其在兽医环境中。

在为扩展单次注射氟苯尼考益处的努力中，技术已将氟苯尼考酯衍生物视为前药。例如Murthy等在公布的U.S.专利申请号2005/0014828中论述了酯化的氟苯尼考例如氟苯尼考乙酸酯、氟苯尼考丙酸酯、氟苯尼考丁酸酯、氟苯尼考戊酸酯、氟苯尼考己酸酯、氟苯尼考庚酸酯、氟苯尼考辛酸酯、氟苯尼考壬酸酯、氟苯尼考癸酸酯、氟苯尼考十一烷酸酯、氟苯尼考十二烷酸酯和氟苯尼考邻苯二甲酸酯等。

在共同拥有的公布的U.S.专利申请号2005/0182031中也论述了氟苯尼考磷酸酯形式的氟苯尼考，其具有增加的水溶性和前药活性。

然而在本领域中，对在合适的载体中具有增加的溶解性的可提供经济的单剂量治疗的其它苯丙醇类存在长期需求。

在本文中任何参考文献的引用，不应视为承认此类参考文献可作为本申请的“现有技术”得到。

发明概述

因此，为解决上述需要，本发明提供具有有用的前药性质的苯丙醇类碳酸酯衍生物。在本发明的一个实施方案中，提供对应于式(I)的苯丙醇碳酸酯化合物：

式I

其中R₁选自：

和

R₂选自二氯甲基、二氟甲基、氯氟甲基、氯代甲基和甲基，

R₃选自羟甲基、氟代甲基、二氟甲基、三氟甲基和CH₂O-C(O)O-R₅，

R₄和R₅独立选自取代的或未取代的C_1-10直链、支链或环状烷基；取代的或未取代的C_1-10烷氧基烷基；C_1-10芳基；C_1-10芳基烷基；取代的或未取代的C_1-10直链、支链或环烯基。优选，R₃为CH₂F。在特定的实施方案中，R₁为CH₃SO₂，R₂为CHCl₂，R₃为CH₂F。另外，当R₁为NO₂时，R₃不为CH₂O-C(O)O-R₅。

在另一个实施方案中，R₄和R₅独立被选自以下的部分取代：甲基、甲氧基、羧基、烷氧羰基和酰氧基。

在还另一个实施方案中，R₄和R₅独立选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、异戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十二烷基、正十八烷基、2-甲基-丁基、1-乙基-丙基、3-甲基-丙-2-烯基、2-甲氧基-乙基、2-乙氧基-乙基、2-丙氧基-乙基、2-丁氧基-乙基、1-甲基-2-甲氧基-乙基、环丙基-甲基、环戊基-甲基、环己基-甲基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、3，7-二甲基辛-6-烯基、苄基、2-甲基-苄基、3-甲基-苄基、4-甲基-苄基、2-甲氧基-苄基、3-甲氧基-苄基、4-甲氧基-苄基、甲基-2-呋喃基、2-(甲氧基-乙氧基)-乙基、2-(乙氧基-乙氧基)-乙基、2-[2-(甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-[2-(乙氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-(羟基-乙氧基)-乙基、2-[2-(羟基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-乙酰氧基-乙基、2-(乙酰氧基-乙氧基)-乙基、3-乙酰氧基-丙基、2-羧基-乙基、3-羧基-丙基、4-羧基-丁基、2-甲氧基羰基-乙基、3-甲氧基羰基-丙基、4-甲氧基羰基-丁基、2-甲氧基羰基-苄基、3-甲氧基羰基-苄基、4-甲氧基羰基-苄基、1-乙氧基羰基-乙基、1-甲氧基羰基-乙基、苯基、4-甲基-苯基、4-甲氧基-苯基、4-羧基-苯基、2-羧基-苯基、4-甲氧基羰基-苯基、2-甲氧基羰基-苯基和4-乙酰氨基-苯基。

在再一个实施方案中，R₁选自

和

R₂为二氯甲基或二氟甲基，R₃选自羟甲基、氟代甲基和CH₂O-C(O)O-R₅，和任选，

R₄选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、异戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十二烷基、正十八烷基、2-甲基-丁基、1-乙基-丙基、3-甲基-丙-2-烯基、2-甲氧基-乙基、2-乙氧基-乙基、2-丙氧基-乙基、2-丁氧基-乙基、1-甲基-2-甲氧基-乙基、环丙基-甲基、环戊基-甲基、环己基-甲基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、3，7-二甲基辛-6-烯基、苄基、2-甲基-苄基、3-甲基-苄基、4-甲基-苄基、2-甲氧基-苄基、3-甲氧基-苄基、4-甲氧基-苄基、甲基-2-呋喃基、2-(甲氧基-乙氧基)-乙基、2-(乙氧基-乙氧基)-乙基、2-[2-(甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-[2-(乙氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-(羟基-乙氧基)-乙基、2-[2-(羟基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-乙酰氧基-乙基、2-(乙酰氧基-乙氧基)-乙基、3-乙酰氧基-丙基、2-羧基-乙基、3-羧基-丙基、4-羧基-丁基、2-甲氧基羰基-乙基、3-甲氧基羰基-丙基、4-甲氧基羰基-丁基、2-甲氧基羰基-苄基、3-甲氧基羰基-苄基、4-甲氧基羰基-苄基、1-乙氧基羰基-乙基、1-甲氧基羰基-乙基、苯基、4-甲基-苯基、4-甲氧基-苯基、4-羧基-苯基、2-羧基-苯基、4-甲氧基羰基-苯基、2-甲氧基羰基-苯基和4-乙酰氨基-苯基。

在还再一个实施方案中，R₁为CH₃SO₂或NO₂，R₂为CHCl₂，R₃为OH，R₄为乙基，或者，R₁为CH₃SO₂或NO₂，R₂为CHCl₂，R₃为

R₄为乙基。

优选，本发明苯丙醇碳酸酯选自以下化合物：

和

本发明还尤其包括本文中举例说明的化合物，它们包括下文表2中列出的苯丙醇碳酸酯。

另外，还考虑本发明化合物包括双苯丙醇碳酸酯。例如，此类双苯丙醇碳酸酯包括含以下式II结构的化合物。

式II

其中R₁选自

和

其中a、c和e是独立在0-4数值范围的整数，b和d是独立在0-2数值范围的整数，条件是整数a、b、c、d和e的和在2-8的数值范围，和

R₅₁和R₅₂独立选自H、甲基、羟基、甲氧基和乙酰氧基。优选，a、b、c、d和e的和在2-4的数值范围。

更优选，本发明包括式II化合物，其中R₁为

R₃为CH₂F。

甚至更优选，本发明包括式II化合物，该式II化合物具有选自以下的结构：

和

在再一个实施方案中，本发明还包括药用组合物，该组合物含有有效量的式I或式II苯丙醇碳酸酯化合物或其溶剂合物以及药学上可接受的赋形剂或溶剂。优选，苯丙醇碳酸酯占组合物重量约80％-约5％。

优选，药学上可接受的溶剂包括至少一种药学上可接受的醇例如苯甲醇。通常，药用组合物的醇含量占组合物重量约5％-约98％。优选，醇含量范围为组合物重量的约10％-约90％。更优选，醇含量范围为组合物重量的约20％-约45％。苯甲醇浓度高达45％(重量)尤其最好。

本发明还包括药用组合物，所述组合物含有有效量的式I苯丙醇碳酸酯以及药学上可接受的赋形剂或溶剂，其中R₁为CH₃SO₂，R₂为CHCl₂，R₃为CH₂F。

本发明还进一步包括药用组合物，所述组合物含有有效量的式I或式II苯丙醇碳酸酯以及药学上可接受的赋形剂或溶剂，并含相应的苯丙醇，其中所述相应的苯丙醇为与式I或式II苯丙醇碳酸酯在体内分别释放的苯丙醇相同的苯丙醇。

还考虑本发明药用组合物还包含至少一种其它治疗药物，可在给予本发明苯丙醇碳酸酯之前、之后和/或同时，给予有需要的动物该其它治疗药物。

其它药物是例如氟苯尼考和/或适合给予有需要的动物的任何其它种类药物。这种其它药物包括例如抗生素(endectocidal)化合物例如阿弗菌素。仅作为实例，阿弗菌素选自伊维菌素、多拉克丁、阿巴克丁、司拉克丁、因灭汀、依立诺克丁、莫昔克丁、米尔倍霉素及其组合。优选，阿弗菌素化合物存在的量为约0.03％w/v-约20％w/v。其它药物还可包括杀吸虫剂，任选与抗生素药物或下文中更详述的其它药物联合。

在又还再一个实施方案中，本发明包括药用组合物，该组合物含式I苯丙醇碳酸酯和组合应用的式III苯丙醇化合物。

式III

其中式I苯丙醇碳酸酯和式III苯丙醇以50:1-1:50(重量)的比例存在，其中R₁为CH₃SO₂，R₂为CHCl₂，R₃为OH或F。式III的R₁、R₂和R₃定义同以上式I。也考虑含使用相同或相似比例的式II和式III的类似组合物。可按需要和/或实践要求，给予动物或鱼预防有效量和/或群防(metaphylaxis)的本发明药用组合物。

本发明还提供按需要和/或实践要求给予预防有效量和/或群防的本发明药用组合物的相应方法。本发明还提供在有需要的动物中治疗或预防疾病或病症的方法。此类方法可包括给予药学有效量的式I和/或式II苯丙醇碳酸酯，它们包括下文所述实施例1-30的任何化合物。有效量范围为例如约1-约150mg/kg治疗动物体重。广义地说，治疗动物是由给予本发明化合物得到益处的任何动物。通常，治疗动物是哺乳动物、鸟、鱼、爬行动物或无脊椎动物，包括在下文中更详细列举的任何动物。

本发明还提供合成式I化合物的方法，该方法包括在合适的溶剂中使苯丙醇化合物与相应的氯甲酸酯反应。合适的溶剂可包括例如氯化溶剂、酯溶剂、聚醚溶剂、甲醛缩醛醚、环醚、酮、混合醚-酯溶剂和二甘醇，优选包括四氢呋喃。

优选，在催化剂例如4-二甲基氨基-吡啶、4-甲基吡啶、吡啶及其组合的存在下，进行该合成方法。

优选，在酸清除剂例如三乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾及其组合的存在下，进行合成方法。

优选进行该合成方法，其中所述氯甲酸酯是

其中R₄定义同以上式I。

优选进行该合成方法，其中所述苯丙醇化合物具有以下结构：

或

在反应期间，氯甲酸酯相对于苯丙醇化合物按摩尔过量存在。R₁和R₂定义同以上式I。

合成式II化合物的方法包括在合适的溶剂中使苯丙醇化合物与相应的双氯甲酸酯反应，其中苯丙醇化合物相对于氯甲酸酯摩尔过量。

优选，在制备式II化合物的方法中，苯丙醇是以下化合物，

优选该双氯甲酸酯是

R₁和R₂定义同以上式I和或式II。

附图简述

图1A举例说明用氯甲酸酯合成氟苯尼考和氟苯尼考类似物的苄基碳酸酯前药的反应流程1。

图1B举例说明由二羟基苯丙醇(氯霉素型)合成苄基碳酸酯前药酯的反应流程2。

图2A举例说明用小于1摩尔当量的氯甲酸酯试剂，由二羟基苯丙醇合成苄基碳酸酯前药酯的反应流程3(二羟基型苯丙醇，方法A)。

图2B举例说明用保护基策略合成二羟基苯丙醇的苄基单碳酸酯前药(氯霉素型)的反应流程4(二羟基型苯丙醇，方法B)。

图3A举例说明用选择性水解策略，合成二羟基苯丙醇的苄基单碳酸酯前药(氯霉素型)的反应流程5(二羟基型苯丙醇，方法C)。

图3B举例说明用X-(O)C-O-R₄试剂而非氯甲酸酯，合成氟苯尼考和氟苯尼考类似物苄基碳酸酯前药的反应流程6。＂X＂的值范围由下表1给出。

图4举例说明苯丙醇碳酸酯化合物D的合成，该方法通过使原料醇A与三乙胺反应，得到氯甲酸酯B，且使其与苯丙醇C反应，得到化合物D。

图5举例说明苯丙醇双碳酸酯化合物F的合成，该方法通过使双氯甲酸酯E与底物C反应，得到苯丙醇碳酸酯化合物F。

图6举例说明苯丙醇碳酸酯化合物H的合成，该方法通过使氯甲酸乙酯B与底物G和三乙胺(未显示)反应，得到苯丙醇苄基双碳酸酯化合物H、苄基碳酸酯I和伯醇碳酸酯。

图7a举例说明合成其中R₄与R₅不同的双碳酸酯的反应流程7a。

图7b举例说明备选的合成其中R₄与R₅不同的双碳酸酯的反应流程7b。

发明详述

因此，本发明提供碳酸酯形式的苯丙醇例如氟苯尼考前药。一般而言，此类苯丙醇碳酸酯难溶于水，但易溶于可用于注射给药的其它合适的非刺激性有机溶剂，此类酯可用于治疗和/或预防细菌感染。本发明化合物可在体内容易地转化为游离的活性抗生素药物。

为更全面理解本发明，提供以下定义。

在本说明书中，为了方便目的的单数术语的使用决非如此限定。因此，例如涉及“一种微生物”包括涉及一种或多种此类微生物。除另有说明外，复数术语的使用也是非限制性的。例如，除另有说明外，短语如“苯丙醇的碳酸酯衍生物”是指本文中鉴别的苯丙醇的任何碳酸酯衍生物，包括单独的单个这种化合物或两种或多种此类化合物的组合。

本文中使用的术语“近似”与术语“约”互换使用，除另有说明外，通常表示在所述值的20％内的值。

本文中使用的术语“前药”表示是药物前体的化合物，给予患者后，通过代谢或化学过程，该化合物经历化学转化，产生活性药物，例如苯丙醇抗生素的碳酸酯是在体内释放苯丙醇抗生素的前药。

本文中使用的术语苄基表示取代基或取代连接，其中取代基或取代基连接在脂族饱和碳原子上，该碳原子直接与苯基或取代的苯环连接。术语苄基碳酸酯表示与这种苄基位置连接的碳酸酯取代基O-(O)C-OR。

本文中使用的“药用组合物”是指本发明化合物包括其溶剂合物(例如氟苯尼考前药)和药学上可接受的赋形剂和/或载体的制剂。存在于载体中的本发明化合物的量为约1％-约80％(重量)。在特定的实施方案中，载体是本发明化合物的溶剂，该溶剂相对不刺激活组织且适合注射，例如某些有机溶剂。

有机溶剂的粘度变化很大，作为苯丙醇和苯丙醇前药的制剂的组分，它们为最终制剂提供粘性。因此，较低粘度的有机溶剂是苯丙醇类和苯丙醇前药的高浓度制剂的优选的组分。例如，醇类例如乙醇、异丙醇、苯甲醇、甘油缩甲醛(formal)(例如1，3-二氧六环-5-醇和1，3-二氧戊环-4-基甲醇的平衡混合物)、低分子量乙二醇(ethylene glycerol)单醚代表注射剂可接受的低粘度溶剂的实例。相对低粘度的其它溶剂例如酯(乙酸苄酯、乙二醇二乙酸酯、丙二醇二乙酸酯)、醚(低分子量乙二醇或丙二醇的二醚)或酰胺(2-甲基吡咯烷酮、2-吡咯烷酮)也可用作降低苯丙醇碳酸酯前药溶液总粘度的溶剂混合物的组分。但是，此类溶剂或含此类溶剂的组合通常不会给母体苯丙醇药物提供足够的溶解性。可通过使用苯丙醇苄基碳酸酯前药，在低粘度溶剂或含大比例低粘度溶剂的溶剂混合物中，仍可得到需要的苯丙醇类高浓度。优选的溶剂是与任选的赋形剂联合的苯甲醇。更优选的是含比例为2:1(体积/体积)的三醋精/苯甲醇的载体。

“赋形剂”是指为进一步促进给予活性成分而加入到药理组合物中的惰性物质。赋形剂的实例包括但不限于例如需要的各种糖和各种淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油和聚乙二醇以及已知技术稳定剂、着色剂等。

本文中使用的术语“治疗有效量”是指可足够快速水解并以足量提供活性苯丙醇浓度的本发明前药的量，该浓度可缓解患者中一种或多种细菌感染症状至某种程度。在特定的实施方案中，治疗有效量是指当给予患者后，活性抗生素例如苯丙醇以足够血浆浓度递送给患者以便达到以下效果的本发明化合物的量：(1)减少，优选消除患者体内细菌细胞群体；(2)抑制(即延缓或优选终止)细菌细胞增殖；(3)抑制(即延缓优选终止)细菌感染传播；和/或(4)缓解(优选消除)与感染有关的一种或多种症状。

术语“预防有效量”是指给予动物或鱼后达到相应活性抗生素的足够的血浆浓度，以致于对该活性抗生素敏感的细菌的感染可能性和/或程度显著减少的本发明前药的量。在给予较早的抗生素方案后，还可用预防有效量的本发明化合物在动物或鱼中维持细菌细胞群体的下降水平(或消除)。

“群防”是定时集中给予整个动物组药物，以消除或使预期疾病爆发最小化，例如在具有高感染风险的一种或多种动物中消除或使预期疾病爆发最小化。在一个特定的实施方案中，高风险小牛是健康史未知的重量轻的混合型远程运送的牛。

本文中使用的术语“最小抑制浓度”与＂MIC＂混用。＂MIC50＂是使50％分离株生长抑制的化合物(例如本发明前药)的浓度。同样，MIC90是使90％分离株生长抑制的化合物的浓度。

在本文中本发明化合物的合成部分上下文中使用的“合适的”溶剂是指溶剂，其中反应物可溶解，且在反应中不会由自身与一种或多种反应混合物成分反应或通过干扰成分之间相互反应产生有害沉淀。对于任何给出的反应，合适的溶剂选择完全在本领域技术人员的能力范围内，且无需不适当的实验即可完成。

本发明化合物的合成

以下反应流程举例说明如何制备本发明化合物。

流程1

用氯甲酸酯合成氟苯尼考和氟苯尼考类似物苄基碳酸酯前药

在一个实施方案中，适用于只有苄基羟基的苯丙醇类(例如氟苯尼考及其类似物)的制备苄基碳酸酯前药的便利方法通过图1A举例说明。如所示，在适当的溶剂中，用或不用催化剂，使苯丙醇化合物(1)与相应的氯甲酸酯反应，得到苄基碳酸酯(2)。所有图中的R₁、R₂和R₄定义同以上给出的式I化合物。合适的溶剂包括例如氯化溶剂例如二氯甲烷和1，2-二氯乙烷；酯溶剂例如乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸异戊酯、乙二醇二乙酸酯、丙二醇二乙酸酯、甘油三乙酸酯；单醚溶剂例如乙醚、异丙醚、甲基叔丁基醚；聚醚溶剂例如乙二醇醚；二甲基乙二醇醚、二甘醇醚；二甘醇二甲基醚、二甘醇二乙基醚；甲醛缩醛醚例如二甲氧基甲烷、二乙氧基甲烷、二丁氧基甲烷；环醚例如四氢呋喃、1，3-二氧戊环、1，4-二□烷；酮溶剂例如丙酮、甲乙酮、甲基异丁基酮；由乙二醇和二甘醇的单醚代表的混合醚/酯溶剂例如2-甲氧基乙基乙酸酯、2-乙氧基乙基乙酸酯、2-(甲氧基-乙氧基)乙基乙酸酯、2-(乙氧基-乙氧基)乙基乙酸酯。以下提供的实例举例说明四氢呋喃作为溶剂的用途。

在将苯丙醇转化为苄基前药的反应中，任选使用相对于苯丙醇摩尔数过量(最高达3倍)的氯甲酸酯试剂、催化剂或催化剂组合、催化剂和酸清除剂的组合、延长的反应时间和升高的温度。优选的催化剂包括例如4-二甲基氨基-吡啶、4-甲基吡啶和吡啶。优选的酸清除剂包括例如三乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠和碳酸钾。优选在约0℃-约50℃下，使反应进行约0.5-约10小时。

通常，在0℃下，通过将1.5-2.0当量氯甲酸酯的四氢呋喃溶液加入含苯丙醇、1.0当量三乙胺和0.5当量4-N，N-二甲基氨基吡啶的四氢呋喃溶液进行反应，让反应继续进行至完成。可通过本领域中的标准方法，将未反应的苯丙醇(如果反应后仍存在)完全除去，或任选让其留在最后纯化的苄基碳酸酯前药物质中，以便给药后立即提供初始增加水平的氟苯尼考。

例如通过使相应的醇与光气或光气等同物(例如二光气、三光气)反应，制备氯甲酸酯试剂。最好，得到的粗氯甲酸酯溶液可不经纯化直接用于碳酸酯形成步骤。或者，如果有售，市售氯甲酸酯可用于碳酸酯形成步骤。合适的氯甲酸酯的市售来源包括例如Aldrich和Lancaster。

流程2

氯霉素型(二羟基苯丙醇)的苄基/伯醇双碳酸酯前药的合成

在再一个实施方案中，如图1B所示，也可通过将苄基羟基选择性转化为相应的碳酸酯前药或将苄基和末端伯羟基均转化为前药部分，形成苄基/伯醇双碳酸酯前药，由苯丙醇例如具有两个羟基的化合物(3)(例如氯霉素、甲砜霉素、乙酰苯丙醇)制备苄基碳酸酯前药酯例如化合物(4)。

可用类似于上述氟苯尼考类苯丙醇的条件，通过用两个或多个当量的适当的氯甲酸酯处理相应的苯丙醇，将具有两个羟基的苯丙醇(氯霉素型)转化为苄基/伯醇双碳酸酯前药。按照此类条件，可实现两个羟基官能团同时转化，得到苄基/伯醇双碳酸酯前药(流程2)。

流程3

氯霉素型(二羟基苯丙醇)苄基单碳酸酯前药的合成方法A

如图2A所示，可用小于1摩尔当量的氯甲酸酯试剂，通过用表5中所示溶剂进行结晶或例如通过硅胶层析，将需要的苄基碳酸酯前药从得到的单碳酸酯和双碳酸酯的混合物中分离，制备氯霉素型(二羟基，R₁＝NO₂)苄基单碳酸酯前药(流程3)。

流程4

氯霉素型(二羟基苯丙醇)苄基单碳酸酯前药的合成-方法B

如图2B所示，可用保护基策略，通过在伯醇官能团上选择性引入保护基，然后使其与氯甲酸酯反应，在苄醇上选择性引入碳酸酯前药部分，制备氯霉素型(二羟基，R₁＝NO₂)苄基单碳酸酯前药(流程4)。

用于保护伯醇的保护基可以是酯基例如甲酸酯、乙酸酯、苯甲酸酯、新戊酸酯(pivaloate)；碳酸酯基例如叔丁氧基碳酸酯；甲硅烷基保护基例如三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基。在苯丙醇分子的苄醇位置上引入需要的碳酸酯前药部分后，可用适合除去特定基团的条件，通过化学法除去保护基(Protective Groups in Organic Synthesis；Theodora W.Greene，Peter G.M.Wuts；第3版，June1999，John Wiley &Sons Inc)，或通过选择性酶水解将保护基除去而不影响苄基碳酸酯前药部分(流程4)。

流程5

氯霉素型(二羟基)苄基单碳酸酯前药的合成-方法C

如图3A所示，也可通过先制备苄基/伯醇双碳酸酯前药，然后通过化学或酶法将伯醇碳酸酯官能团选择性水解，制备氯霉素型(二羟基苯丙醇，R₁＝NO₂)苄基单碳酸酯前药(流程5)。

流程6

用X-(O)C-O-R₄试剂而非氯甲酸酯合成氟苯尼考和氟苯尼考类似物苄基碳酸酯前药

如图3B所示，也可用非氯甲酸酯试剂制备苯丙醇的苄基碳酸酯前药。可使用具有非氯离去基团的试剂，以便按类似于与氯甲酸酯反应的方式，加或不加入催化剂，引入碳酸酯部分。可用于这种转化的此类试剂的无数实例存在于文献中，以下提供一些。

参见图3B流程6，X的值可包括下表1中列举的任一部分。各个这种部分引用代表性参考文献，各自通过引用结合到本文中。

表1

流程7a和7b

在苄醇和伯醇官能团上含不同碳酸酯部分的氯霉素型(二羟基苯丙醇)的苄基/伯醇双碳酸酯前药的合成

如图7A所示，可按流程7a所示，用通过上述方法A-C得到的苄基单碳酸酯(化合物6)，制备在苄醇和伯醇官能团上含不同碳酸酯部分的氯霉素型(二羟基苯丙醇)苄基/伯醇双碳酸酯前药，再使它们与氯甲酸酯Cl-(O)C-O-R₅(R₄≠R₅)或与流程6有关的上述类型X-(O)C-O-R₅(R₄≠R₅)试剂反应。

或者，可先将需要的碳酸酯前药官能团引入到伯醇官能团上，可再使得到的伯醇碳酸酯中间体(化合物5)与氯甲酸酯Cl-(O)C-O-R₄(R₄≠R₅)反应，或通过与流程6有关的上述类型X-(O)C-O-R₄(R₄≠R₅)试剂反应，得到需要的苄基/伯醇双碳酸酯前药(按图7B制备流程7b所示)。该特定合成流程可方便的利用预计的伯醇官能团的较高反应性。

本发明化合物的使用方法

本发明还提供通过本发明化合物在体内释放的一种或多种抗生素药物，给予预防有效量的方法，用于按需要和/或实践要求防止即预防和/或群防和/或治疗感染，例如可预防和/或治疗的细菌感染等。优选如此保护或治疗的动物，但不排除脊椎动物，更优选哺乳动物、鸟或鱼。可给予动物患者任何本发明化合物或此类化合物的合适组合。合适的动物患者包括那些野生动物、家畜(例如为肉、奶、奶油、蛋、毛皮、皮革、羽毛和/或羊毛目的饲养的)、驮畜、研究动物、伴侣动物和为/在动物园、野外栖息地和/或马戏团中饲养的那些动物。

在特定的实施方案中，动物患者是哺乳动物。可治疗的哺乳动物包括灵长目动物，例如猴、大猩猩和任选人。其它哺乳动物患者是牛(例如牛或奶牛)、猪(例如公猪或猪)、羊(例如山羊或绵羊)、马(例如马)、犬(例如狗)、猫(例如家猫)、骆驼、鹿、羚羊、兔、豚鼠和啮齿类动物(例如松鼠、大鼠、小鼠、沙鼠和仓鼠)、鲸类动物(鲸、海豚、小鲸)、鳍足动物(pinnipeds)(海豹、海象)。鸟包括鸭科(例如天鹅、鸭和鹅)、鸠鸽科(例如小野鸽和家鸽)、雉科(例如鹧鸪、松鸡和火鸡)、Thesienidae(例如家鸡)、鹦鹉目(例如长尾小鹦鹉、金刚鹦鹉和鹦鹉)、猎禽和平胸类鸟(例如鸵鸟)。

由本发明化合物治疗或保护的鸟可与商业或非商业鸟类饲养有关。这些包括例如鸭科例如天鹅、鹅和鸭；鸠鸽科例如小野鸽和家鸽例如家鸽；雉科例如鹧鸪、松鸡和火鸡；Thesienidae例如家鸡；鹦鹉目例如其中作为宠物饲养或为收藏家市场饲养的长尾小鹦鹉、金刚鹦鹉和鹦鹉。

按照本发明目的，术语“鱼”应理解为包括但不限于分在Teleosti组的鱼即硬骨鱼。鲑目(它包括鲑科)和鲈形目(它包括棘臀鱼科)包括在Teleosti组中。其中潜在鱼接受者的实例包括鲑科、鲻科、鲷科、丽鱼科、太阳鱼科、三线矶鲈(Parapristipoma trilineatum)和蓝眼琵琶鱼(Plecostomusspp)。

另外，潜在鱼接受者的实例包括鲑科、鲻科、鲷科、丽鱼科、太阳鱼科、三线矶鲈(Parapristipoma trilineatum)和蓝眼琵琶鱼(Plecostomusspp)。仅用于举例说明目的，下表中列出用本发明化合物治疗的其它鱼。

鲑科

鲻科的某些成员

Sparidae科的某些成员

Cichlidae 科的某些成员

棘臀鱼科的某些成员

可治疗的鱼的还其他的实例包括但不限于鲶鱼、锯鮨、金枪鱼、大比目鱼、北极嘉鱼、鲟鱼、大比目鱼、比目鱼、鳎鱼、鲤鱼、罗非鱼、条纹石鮨、鳝鱼、海鲷、长背鰤、琥珀鱼、鲶科鱼和遮目鱼。

还考虑其它动物也可受益于本发明方法，它们包括有袋动物(例如袋鼠)、爬行动物(例如饲养龟)、甲壳动物(例如龙虾、螃蟹、虾和明虾)软体动物(例如章鱼和贝类)，和本发明方法可安全和/或有效治疗和/或预防其感染的其它经济价值大的动物。

在另一个实施方案中，患者是伴侣动物。按照本发明目的，术语“伴侣”动物应理解为包括家猫(猫科动物)、狗(犬科动物)、兔类、马(马科动物)、豚鼠；啮齿类动物(例如松鼠、大鼠、小鼠、沙鼠和仓鼠)；灵长目动物(例如猴)和鸟例如家鸽、小野鸽、鹦鹉、长尾小鹦鹉、金刚鹦鹉、金丝雀等。

药用组合物

可同样的给予有需要的动物本发明化合物或该化合物的生理上可接受的溶剂合物，或可给予其中前述物质与合适的赋形剂混合的药用组合物。制剂和给药技术可在Remington′s Pharmacological Sciences，Mack Publishing Co.，Easton，PA，最新版中找到。在Remington中论述的制剂和技术主要与人类患者的使用有关；但是，可通过兽医技术人员熟知的技术容易地将它们改为非人类患者使用。

当本文中所述本发明化合物作为动物饲料成分给予，或溶于或悬浮于饮用水时，提供组合物，其中活性药物充分地分散在惰性载体或稀释剂中。惰性载体是不与本发明化合物反应并可安全地给予动物的载体。优选，用于饲料给予的载体是或可以是动物定量饲料(animalration)的成分。

合适的组合物含有饲料预混物或补充剂，其中活性成分的存在量相对大，且它们适合直接给予动物或直接或经中间稀释或混合步骤后加入饲料。适合此类组合物的典型的载体或稀释剂包括例如干酒糟、玉米粉、柑桔渣、发酵残渣、牡蛎壳粉、小麦麸粉、糖蜜残汁、玉米穗轴粗粉、食用豆粉饲料、大豆粗粉、石灰粉等。通过方法例如粉碎、搅拌、研磨或翻倒，将本发明化合物充分地分散在整个载体中。含约0.05％-约5.0％或约0.005％-约2.0％(重量)本发明化合物的组合物尤其适合作为饲料预混物。直接给予动物的饲料补充剂含约0.0002％-0.3％(重量)的本发明化合物。

按给予成品饲料治疗和控制敏感微生物需要的活性化合物浓度的量，将此类补充剂加入动物饲料。尽管本发明化合物的期望浓度将根据上述因素和使用的具体衍生物变化，但通常在饲料中按约0.0001％-0.02％或约0.00001％-约0.002％浓度给予所述化合物，以便达到需要的抗微生物效果。

给药途径

本文中使用的“给予”或“给药”是指为治疗或预防微生物感染，而将本发明化合物或溶剂合物或含本发明化合物的药用组合物递送给生物体。

合适的给药途径可包括但不限于经口、直肠、局部、透粘膜、肌内、皮下、髓内、鞘内、直接室内、静脉内、玻璃体内(intravitreal)、腹膜内、鼻内、耳或眼内。优选的给药途径是经口和肠胃外。

或者，可按局部而非全身方式例如通过直接涂在感染区域的药膏制剂或局部施用制剂或通过将化合物直接注射到感染组织中，给予所述化合物。在任一情况中，均可使用缓释制剂。

因此，可通过任何公认的给药模式或用于类似效用的物质，按纯形式或适当药用组合物形式，给予本发明化合物或其药学上可接受的溶剂合物。给药途径可以是普通技术人员已知的任何途径。可按任何公认的技术形式即固体、半固体、冻干粉末或液体剂型例如片剂、栓剂、丸剂、软弹性胶囊剂和硬明胶胶囊剂、散剂、溶液、混悬剂或气雾剂等，按适合简单给予准确剂量的单位或多个剂量形式，给予有需要的那些动物本发明化合物。组合物包含常规药物载体或赋形剂和作为活性药物的本发明化合物，另外还可包含其它药剂、药物、载体、助剂等。

组合物/制剂

可通过本领域熟知的方法例如用多种熟知的混合、溶解、制粒、糖锭剂制备、研磨、乳化、包胶、包埋或冻干方法，制备本发明药用组合物。可与一种或多种生理上可接受的载体组合配制组合物，载体包括可促进将活性化合物加工成可药用的制剂的赋形剂和助剂。合适的制剂取决于所选择的给药途径。

对于包括但不限于静脉内、肌内和皮下注射在内的注射，可用极性溶剂配制本发明化合物，此类溶剂包括但不限于丙二醇；醇类例如苯甲醇或乙醇、聚乙二醇；和N-甲基-2-吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、其它吡咯烷酮；N，N-二甲基乙酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、丙酮、甘油醋酸酯、甘油缩甲醛、任选的浓度最高达10％的水；和任何前述赋形剂或普通技术人员已知的其它物质的组合。对于跨粘膜给药，在制剂中使用适合透过屏障的渗透剂。此类渗透剂在本领域中通常已知。

剂量

治疗有效量是指有效预防和/或使微生物感染最小化和/或治疗、减轻和/或缓解微生物感染引起的症状的化合物的量。治疗有效量的测定完全在本领域技术人员的能力范围内，尤其可按照本文中的发明内容测定。

对于用于本发明方法的任何化合物，首先可由本发明前药化合物释放的抗生素药物的已知性质估计治疗有效量。然后，配制用于动物模型的剂量，以达到等于或大于本领域中已知的最小抑制浓度(＂MIC＂)的循环浓度范围。然后可用这种信息更准确地确定可用于患者的剂量。

可通过标准药剂方法，在细胞培养物或实验动物中测定本文所述化合物的毒性和疗效。例如，可通过本领域中熟知的方法，测定特定化合物的最小抑制浓度(＂MIC＂)和处理组的50％致死剂量(＂LD₅₀＂)。例如，按照临床和实验室标准研究所(Clinical and Laboratory StandardsInstitiute)(CLSI)＂提出的指导原则测定MIC。

可用得到的数据制定可用于患者的剂量范围。该剂量自然可以改变，它取决于剂量形式和给药途径。相关临床师可根据患者的病症，选择确切的制剂、给药途径和剂量(参见例如Fingl，et al.，1975在＂ThePharmacological Basis of Therapeutics＂，Ch.1 p.1中所述)。广义地说，按有效达到和/或使释放的抗生素在血浆和身体组织中的浓度维持在有效治疗和消除敏感传染性微生物或防止新的感染的水平上的剂量，并保持足够长时间以达到需要的目标，给予需要这种治疗的动物本发明化合物。熟练技术人员会认识到，按照临床反应，以下估计的剂量范围可调节，并解释由各相应前药化合物释放的苯丙醇抗生素的相对量和每前药(单与双)碳酸酯化合物的苯丙醇摩尔比。例如对于皮下给药，通常按约1mg-约150mg/kg体重剂量给予本发明化合物。给药频次范围也可以是单个剂量/日-多个剂量/日。对于经口给药，优选按每日一次给予剂量。

可个别调节剂量量和间隔时间，以提供足以维持大于或等于MIC或任何其它需要的水平的浓度的化合物的血浆水平。此类血浆水平通常称为最小有效浓度(MECs)。每个化合物的MEC各不相同，但可由体外数据例如达到80％以上微生物群体抑制的必需浓度估计。可用本文中所述测定确定MEC。达到MEC的必需剂量应取决于化合物的具体特性和/或动物和/或给药途径。可用HPLC测定或生物测定确定化合物的血浆浓度和/或其相应的活性产物。

也可用MEC值确定剂量时间间隔。应用在10-90％时间内保持高于MEC的血浆水平的方案给予化合物。

在局部给药或选择性摄取的情况下，有效局部药物浓度可与血浆浓度无关，且可用本领域中已知的其它方法测定正确的剂量量和时间间隔。

可按每日一次或分为多个剂量给予组合物。通常仅一个剂量就足以治疗感染。在某些情况下，为治疗动物，需要先给予一个剂量，48小时后再给予第二个剂量。如本领域普通技术人员意识到的那样，确切的剂量应取决于感染的阶段和严重性、感染的生物体对组合物的敏感性和所治疗的动物种的个体特性。

给予的组合物的量自然应取决于所治疗的患者；造成感染的病原体或细菌；感染的严重性；给药方式即经口、静脉内、局部等；开处方医师、兽医等的判断。

通常，当使用皮下途径时，按约1mg-约150mg/kg家畜(catle)体重剂量给予本发明化合物。优选，约20mg-约70mg/kg体重剂量。更优选，剂量为约60mg/kg。但是，当通过肌内(IM)途径给予本发明化合物时，优选两次给予剂量，在给予第一个剂量约24-约48小时后，给予第二个剂量。

在猪中，通常按约10mg-约150mg/kg体重剂量给予本发明化合物。优选，约20mg-70mg/kg体重剂量。通常，首次肌内注射约24-约48小时后，进行第二次注射。

在家禽中，通常按约10mg-150mg/kg体重剂量给予本发明化合物。每日用饮用水经口给予前药，只要按临床要求，例如约3-约7天持续给药。

给予水生动物

本发明还提供在鱼和任选的水生无脊椎动物中消除、减少或防止细菌感染的方法。此类方法包括给予有需要的水生动物有效量的本发明化合物。通常通过饲料给予动物有效量的本发明化合物或将动物或动物群体浸没在含有效量的活性化合物溶液的溶液中，完成给药。也可理解，可通过将药物施用到容纳动物的池或其它贮水区域中，让动物通过其腮吸入化合物或吸收本发明化合物剂量，给予本发明化合物。为个别治疗具体动物例如在兽医或养鱼池环境中的某些鱼，直接注射或通过含单独的或与其它药物联合的本发明化合物的渗透释放装置注射是任选的给予本发明化合物的方法。

兽医可按惯例，用在以上其它种类动物中所述参数和方法，测定在鱼或其他水生物种中有效减少、消除或防止细菌感染的本发明化合物的剂量，尽管它可能变化，取决于所治疗的鱼的种、所涉及的具体微生物和感染程度。对于水生物适应症，通常按约1mg/kg-约70mg/kg，优选10mg/kg-30mg/kg剂量给予本发明化合物。合适的给药途径包括：静脉内、皮下、肌内和/或按需要向水生物种喷雾或将水生物浸泡，和/或将化合物直接加入容纳体积的水中。

为经口给药，优选按上述剂量给予本发明化合物约10-约15天。

虽然可分别给予活性成分和食物，但考虑，在优选的方面，将活性物质掺入鱼饲料。可通过将合适量的本发明化合物掺入市售鱼饲料产品达到需要的给药水平，制备加药鱼饲料。掺入鱼饲料的本发明化合物的量取决于饲养鱼的速度。为按约0.2％-4％生物量/天速度饲养鱼，优选加药饲料含约50-10,000mg/kg饲料，更优选约100-2,000mg/kg饲料。

尽管在制成小丸状饲料前，可将本发明化合物加入饲料混合物，但优选通过用本发明化合物将饲料小丸包衣，形成加药饲料。

可用治疗或预防细菌感染的本发明化合物治疗包括淡水和咸水类在内的任何鱼类，和以上列举的无脊椎动物水生物种。

与其它药物和治疗形式的联合

还考虑，本发明前药化合物和其它有效的已知技术药物联合、同时或序贯给予(例如在同一组合物或分开的组合物中)。此类已知技术药物包括例如其它杀微生物剂例如抗生素、抗真菌剂、抗病毒药、驱虫剂等；和营养补充剂、饲料添加剂等。例如，考虑联合给予本发明化合物和任何已知技术标准(非前药)苯丙醇。此类苯丙醇类包括又称为D-(苏型)-1-(4-甲基磺酰基苯基)-2-二氯乙酰氨基-3-氟-1-丙醇的氟苯尼考。另一种优选的抗生素化合物是D-(苏型)-1-(4-甲基磺酰基苯基)-2-二氟乙酰氨基-3-氟-1-丙醇。另一种有效的抗生素是甲砜霉素。这些抗生素化合物的制备方法和可用于此类方法的中间体在U.S.专利号4,311,857；4,582,918；4,973,750；4,876,352；5,227,494；4,743,700；5,567,844；5,105,009；5,382,673；5,352,832和5,663,361中阐述，它们通过引用结合到本文中。其它氟苯尼考类似物和/或前药已公开，此类类似物可用于本发明组合物和方法[参见例如U.S.专利申请公布号；2004/0082553和U.S.专利申请公布号2005/0182031，均通过引用整体结合到本文中]。当抗生素化合物是氟苯尼考时，氟苯尼考的浓度通常为约10％-约50％w/v，优选的水平为约20％-约40％w/v，甚至更优选的水平为至少约30％w/v。

可与本发明化合物联用的另一种有效抗生素化合物是替米考星。替米考星是大环内酯抗生素，其化学定义为20-二氢-20-脱氧-20-(顺式-3，5-二甲基哌啶-1-基)-脱碳糖泰乐菌素，它在U.S.专利号4,820,695中公开报道，其通过引用结合到本文中。又在U.S.专利号4,820,695中公开的是注射剂，它是含50％(体积)丙二醇、4％(体积)苯甲醇和50-500mg/ml活性成分的水溶液制剂。替米考星可以碱或磷酸酯的形式存在。当通过4天注射给药治疗后，发现替米考星可用于治疗呼吸感染，尤其牛溶血性巴斯德菌(Pasteurella haemolytica)感染。因此，替米考星可用于治疗例如新生小牛肺炎和牛呼吸疾病。当存在替米考星时，其存在量为约1％-约50％，优选10％-约50％，在特定的实施方案中，为30％。

可与本发明化合物联用的另一种有效抗生素是托拉霉素(tulathromycin)。可按照U.S.专利公布号2003/0064939 A1中提出的方法制备托拉霉素，其通过引用整体结合到本文中。可按约5.0％-约70％(重量)浓度水平的注射剂量形式，提供托拉霉素。托拉霉素最期望按约0.2mg/kg体重/日(mg/kg/日)-约200mg/kg/日剂量，按单剂量或分剂量(即1-4个剂量/日)给予，更优选1.25、2.5或5mg/kg，每周一次或两次，尽管必须进行变更，它取决于所治疗的物种、体重和患者的病症。可按约5.0％-约70％(重量)浓度水平的注射剂量形式，提供托拉霉素。

可与本发明化合物联用的另一种有效抗生素是氟喹诺酮类抗生素，例如恩氟沙星、达氟沙星、二氟沙星、奥比沙星和马波沙星。在恩氟沙星的情况中，可按约100mg/ml浓度给予，可按约180mg/ml浓度提供达氟沙星。

可与本发明化合物联用的其它有效大环内酯抗生素包括酮内酯类化合物，或更尤其氮杂内酯类。在例如U.S.专利号6,514,945、6,472,371、6,270,768、6,437,151和6,271,255和U.S.专利号6,239,112、5,958,888和U.S.专利号6,339,063和6,054,434中有此类化合物的论述，它们均通过引用整体结合到本文中。

可与本发明化合物联用的其它有效抗生素包括四环素，尤其金霉素和土霉素。

其它抗生素可包括β-内酰胺例如青霉素类中的一种，例如青霉素G、青霉素K、氨苄青霉素、阿莫西林或阿莫西林与克拉维酸或其它β-内酰胺酶抑制剂的组合。其它具体的β-内酰胺包括头孢菌素类例如头孢噻呋、头孢喹肟等。在本发明制剂中，头孢菌素的浓度任选在约1mg/ml-500mg/ml之间变化。

另外，本发明还任选包括在动物中治疗微生物和寄生虫感染的组合物，该组合物包含与一种或多种本发明化合物和任选的载体和/或赋形剂混合和/或组合的一种或多种上列抗生素。

对于所有本文中所述方法和本发明化合物，还考虑鉴别的化合物容易地与杀灭或控制各种类型的寄生虫例如包括本文中所述所有体外寄生虫和体内寄生虫的一种或多种已知技术药物联用。因此，尽管与先前已知药物和使用先前已知药物的方法相比，优选本发明化合物和方法，但在某些任选的实施方案中，考虑将它们与用于杀灭或控制各种害虫的其它已知技术药物或此类已知技术药物的联合药物联合、同时或序贯使用(例如在同一组合物或分开的组合物中)。

与本发明化合物联用的这些其它药物包括例如已知技术的驱虫剂，如阿弗菌素(例如伊维菌素、莫昔克丁、米尔倍霉素)、苯并咪唑(例如阿苯达唑、三氯苯达唑)、水杨苯胺(例如氯生太尔、羟氯扎胺)、取代的酚类(例如硝碘酚腈(nitroxynil))、嘧啶类(例如噻嘧啶)、咪唑并噻唑类(例如左旋咪唑)和吡喹酮。

与本发明化合物联用的其它杀灭或控制害虫的已知技术药物包括有机磷酸酯杀虫剂。该类杀虫剂具有极广泛的活性例如杀虫剂活性，且在某些情况下具有驱肠虫活性。有机磷酸酯杀虫剂包括例如百治灵、特丁硫磷、乐果、二嗪农、乙拌磷、敌百虫、保棉磷、毒死蜱、马拉硫磷、乙酰甲胺磷、甲胺磷、乙酰甲胺磷(acephate)、乙基对硫磷、甲基对硫磷、甲胺磷(mevinphos)、甲拌磷、三硫磷、伏杀硫磷，仅列举几个此类化合物。还考虑包括本发明方法和化合物和氨基甲酸酯类杀虫剂的组合，氨基甲酸酯类杀虫剂包括例如胺甲萘、呋喃丹、涕灭威、禾草特、灭多威等，和与有机氯类杀虫剂的组合。还考虑包括与生物杀虫剂的组合，生物杀虫剂包括例如驱虫剂、除虫菊酯(及其合成变体例如丙烯菊酯、苄呋菊脂、氯菊酯、溴菊酯)和通常用作杀螨剂的烟碱。其它考虑的组合是与各种杀虫剂的组合，它们包括苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)、杀螨酯、甲脒(例如amtitaz)；铜化合物例如氢氧化铜、硫酸氯化铜合氧化铜；氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、三氯杀螨醇、硫丹、来福灵、氰戊菊酯、高三氟氯氰酯、甲氧氯和硫。

另外，对于所有本文中所述方法和新化合物，还考虑鉴别的化合物可容易地与协同剂例如胡椒基醇(PBO)和磷酸三苯酯(TPP)；和/或昆虫生长调节剂(IGRs)和保幼激素类似物(JHAs)例如除虫脲、环丙氯嗪、烯虫酯等联用，从而在动物患者上和动物患者的环境中提供寄生虫的最初和持续控制(在昆虫发育的所有阶段包括虫卵)。

与环戊二烯类杀虫剂、兰尼汀、KT-199和/或较老的已知技术驱虫剂例如阿弗菌素类(例如伊维菌素、莫昔克丁、米尔倍霉素)、苯并咪唑类(例如阿苯达唑、三氯苯达唑)、水杨苯胺类(例如氯生太尔、羟氯扎胺)、取代的酚类(例如硝碘酚腈)、嘧啶类(例如噻嘧啶)、咪唑并噻唑类(例如左旋咪唑)、吡喹酮和某些有机磷酸酯例如萘肽磷和吡唑硫磷的组合也考虑用于此类联合药物中。

尤其是，可用于本发明范围内的其它抗寄生虫化合物优选由阿弗菌素类化合物组成。如上所述，阿弗菌素家族化合物是已知有效的广谱抗哺乳动物体内和体外寄生虫的活性很强的系列抗寄生虫药物。

优选的可在本发明范围内与本发明化合物联用的化合物是伊维菌素。伊维菌素是阿弗菌素的半合成衍生物，通常得到的是至少80％22，23-二氢阿弗菌素B1_a和小于20％的22，23-二氢阿弗菌素B1_b的混合物。伊维菌素在U.S.专利号4,199,569中公开，其通过引用结合到本文中。从1980年代中期以来，伊维菌素就已作为抗寄生虫剂用于治疗各种动物寄生虫和寄生虫疾病。

阿巴克丁是在U.S.专利号4,310,519中公开的称为阿弗菌素B1a/B1b的阿弗菌素，该专利通过引用整体结合到本文中。阿巴克丁含至少80％阿弗菌素B1_a和不超过20％的阿弗菌素B1_b。

另一种优选的阿弗菌素是又称为25-环己基-阿弗菌素B₁的多拉克丁。多拉克丁的结构和制备在U.S.专利号5,089,480中公开，该专利通过引用整体结合到本文中。

另一种优选的阿弗菌素是莫昔克丁。又称为LL-F28249α的莫昔克丁可由U.S.专利号4,916,154得知，该专利通过引用整体结合到本文中。

另一种优选的阿弗菌素是司拉克丁。司拉克丁是25-环己基-25-脱(de)(1-甲基丙基)-5-脱氧-22，23-二氢-5-(羟基亚氨基)-阿弗菌素B₁单糖。

米尔倍霉素或B41是从生产米尔倍霉素的链霉菌属(Streptomyces)株的发酵肉汤中分离的物质。在U.S.专利号3,950,360和U.S.专利号3,984,564中更全面地论述了微生物、发酵条件和分离方法。

可按U.S.专利号5,288,710或5,399,717中所述制备的因灭汀(4＂-脱氧-4＂-表-甲基氨基阿弗菌素B₁)是4＂-脱氧-4＂-表-甲基氨基阿弗菌素B1a和4＂-脱氧-4＂-表-甲基氨基阿弗菌素B1b两个同系物的混合物。优选，使用因灭汀的盐。可用于半发明的因灭汀的盐的非限制性实例包括U.S.专利号5,288,710中所述盐，例如由苯甲酸、取代的苯甲酸、苯磺酸、柠檬酸、磷酸、酒石酸、马来酸等衍生的盐。最优选，用于本发明的因灭汀盐是因灭汀苯甲酸盐。

依立诺克丁的化学名是4＂-表-乙酰氨基-4＂-脱氧-阿弗菌素B₁。尤其开发出用于所有种类的家畜和所有年龄组的依立诺克丁。它是第一个显示抗体内和体外寄生虫广谱活性而在肉和奶中残留最少的阿弗菌素。当局部递药时，它的另一个优点是效力高。

本发明组合物任选包含一种或多种以下抗寄生虫化合物的组合。

U.S.专利申请公布号：2005/0182059中描述了抗寄生虫化合物咪唑并[1，2-b]哒嗪，该文献通过引用结合到本文中。U.S.专利申请公布号：2005/0182139中所述抗寄生虫化合物1-(4-一和二卤甲磺酰基苯基)-2-酰基氨基-3-氟丙醇，该文献通过引用结合到本文中。U.S.专利申请公布号：2006/0063841中所述N-三氟甲磺酰苯胺肟醚衍生物的抗寄生虫化合物，该文献通过引用结合到本文中。U.S.专利申请公布号：2006/0128779中所述抗寄生虫化合物苯基-3-(1H-吡咯-2-基)丙烯腈，该文献通过引用结合到本文中。2006年6月7日提交的U.S.专利申请序号11/448,421中所述抗寄生虫化合物N-[(苯氧基)苯基]-1，1，1-三氟甲磺酰胺和N-[(苯基硫烷基)苯基]-1，1，1-三氟甲磺酰胺衍生物，该文献通过引用结合到本文中。2006年4月10日提交的U.S.专利临时申请序号60/790,893中所述抗寄生虫化合物N-苯基-1，1，1-三氟甲磺酰胺腙，该文献通过引用结合到本文中。

本发明化合物还可与杀吸虫剂联用。合适的杀吸虫剂包括例如三氯苯达唑、芬苯达唑、阿苯达唑、氯舒隆和奥苯达唑。可以意识到，以上组合还可包括抗生素、抗寄生虫和抗吸虫活性化合物的组合。

除以上组合外，还考虑提供本文中所述本发明方法及化合物和其它动物保健品例如微量元素、消炎药、抗感染药、激素、包括防腐剂和消毒剂的皮肤制剂和用于预防疾病的免疫生物制剂例如疫苗和抗毒血清的组合。

例如，此类抗感染药物包括一种或多种抗生素，在用本发明化合物或方法治疗期间任选一起给予，例如按复方组合物和/或分开的剂量形式。适合该目的的已知技术抗生素包括例如上文中列举的那些抗生素。

另外，还考虑本发明方法和化合物最好在同一组合物或不同组合物中，与已知技术动物保健品例如微量元素、维生素、消炎药、抗感染药等联合、同时或序贯使用。

合适的消炎药包括例如甾体和非甾体消炎药。包括其中适用的其外消旋混合物或单一对映体的非甾体消炎药可包括布洛芬、氟比洛芬、酮洛芬、aclofenac、双氯芬酸、阿洛普令、塞来昔布、阿司匹林、二氟尼柳、非诺洛芬、吲哚美辛、甲芬那酸、萘普生、保泰松、吡罗昔康、水杨酰胺、水杨酸、舒林酸、去氧舒林酸(desoxysulindac)、替诺昔康、曲马多、酮咯酸、氟苯柳、双水杨酯、三乙醇胺水杨酸酯、氨基比林、安替比林、羟布宗、阿扎丙宗、辛喷他宗、氟芬那酸、氯尼塞利、氯尼辛、甲氧芬那酸、氟尼柳、秋水仙碱、秋水酰胺、别嘌呤、羟基嘌呤、盐酸苄达明、二甲法登、吲哚克索、吲四唑、盐酸米姆木、盐酸瑞尼托林(paranylene)、氨丁三醇、盐酸苄吲哚林、氟洛芬、异丁芬酸、萘普索、芬布芬、辛可芬、二氟米酮钠、非那莫、氟替阿嗪、美他扎咪、盐酸来替米特、盐酸奈西利定、奥他酰胺、molinazole、新辛可芬、nimazole、柠檬酸普洛沙唑、替昔康、替昔米德、托美丁和三氟米酯。

在特定的实施方案中，本发明化合物与氟尼柳联用，[参见例如U.S.专利号6,790,867B2，该专利通过引用整体结合到本文中]。在有关实施方案中，本发明提供含本发明化合物和氟尼柳的药用组合物。

甾体消炎药包括例如糖皮质激素药物例如地塞米松、可的松、氢化可的松、泼尼松、倍氯米松(beclomethasone)、倍他米松、氟尼缩松、甲泼尼松、帕拉米松、泼尼松龙、曲安松龙(triamcinolome)、阿氯米松、安西奈德、氯倍他索、氟氢可的松、diflurosone diacetate、氟轻松、艾氟龙、氟氢缩松、哈西奈德、甲羟松、莫米松及其药学上可接受的盐和混合物。

包装

如果需要，可按包装或分配器装置例如FDA批准的药剂盒提供组合物，该药剂盒可含一个或多个单位剂量形式，该单位剂量形式含活性成分。该包装可含例如金属或塑料箔例如泡罩包装。包装或分配器装置可附带给药说明书。包装或分配器可附带管理药品生产、使用或销售的政府机构指定形式的与容器有关的通知，该通知是该机构批准的组合物形式或给予人或动物的反应。这种通知例如可以是美国食品和药品管理局批准的处方药标签或批准的产品插入物。也可制备含配制在配伍药物载体中的本发明化合物的组合物，将其置于适当的容器中，贴上所治疗适应症的标签。在任选的实施方案中，包装包含玻璃或塑料瓶或含多个剂量的其它容器。

实施例

提供以下实施例来举例说明本发明的某些实施方案，它们无意也不应以任何方式将它们视为限制本发明的范围。

实施例1-25

氟苯尼考碳酸酯前药的制备

氟苯尼考碳酸酯前药及其类似物的合成

参见图4，在0℃下，在氮气氛下，将原料醇A(0.68M，1.78摩尔当量)和三乙胺(0.68M，1.78摩尔当量)的无水四氢呋喃溶液滴加到三光气(0.48M，0.64摩尔当量)的无水四氢呋喃溶液中。将得到的混合物在0℃下搅拌30分钟，然后通过滤纸快速过滤，将铵盐除去。该氯甲酸酯溶液B的滤液用于以下羧化(carbonation)反应，无需进一步纯化。

将新制氯甲酸酯B溶液或市售氯甲酸酯B(0.34M，1.78摩尔当量)的无水四氢呋喃溶液转移到滴液漏斗中，在0℃下，在氮气氛下，将2/3的溶液滴加到含相应苯丙醇C(0.64M，1摩尔当量，4-N.N-二甲基氨基吡啶(0.5摩尔当量)和三乙胺(1.5摩尔当量)的无水四氢呋喃溶液中。将混合物在0℃下搅拌30分钟，通过薄层色谱监测反应进程。当通过薄层色谱表明反应不完全时，再加入氯甲酸酯溶液，使反应继续进行直至原料消失。使得到的溶液快速通过滤纸过滤，将铵盐除去。将滤液浓缩，加入乙酸乙酯，将粗产物溶解。将得到的溶液依次用1MHCl(水溶液)、饱和NaHCO₃(水溶液)和饱和NaCl(水溶液)洗涤，然后通过硅胶和Na₂SO₄垫快速过滤。将滤液浓缩，得到的粗产物经硅胶闪柱层析或重结晶(用表5列出的溶剂)纯化，得到纯碳酸酯前药D。通过以上方法得到以下实施例编号的化合物：

表2

实施例1

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯甲酯

使粗产物在甲醇/水中重结晶，得到标题产物，为白色固体，收率93％；

H¹-NMR(DMSO-d6)，δ＝3.2ppm(s，3H)，3.70ppm(s，3H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱438.0(M+Na)。

实施例2

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯乙酯

将氟苯尼考(250g，0.7mol)、4-二甲基氨基吡啶(42g，0.35mol)、三乙胺(130ml，0.91mol)的1.2L四氢呋喃溶液在0-5℃下搅拌，同时用加料漏斗滴加纯氯甲酸乙酯(80mL，0.83mol)。通过三乙胺盐酸盐沉淀证明反应进行。将混合物在室温下搅拌30分钟，通过过滤将盐从混合物除去。将滤液浓缩，加入600mL乙酸乙酯，将溶液依次用1MHCl(2×200mL)、饱和NaCl(200mL)洗涤，通过Na₂SO₄/硅胶层过滤。将滤液浓缩，使粗油状物在450mL异丙醇中结晶，得到纯标题产物(286g)。

m.p.110-112℃；H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.2ppm(t，3H)，3.2ppm(s，3H)，4.1ppm(q，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.2ppm(d，1H)；

质谱452.0(M+Na)。

实施例3

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯丙酯

使粗产物在异丙醇中结晶，得到标题产物，为白色固体，收率91％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝0.85ppm(t，3H)，1.58ppm(hex，2H)，3.2ppm(s，3H)，4.1ppm(t，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.2ppm(d，1H)；

质谱466.0(M+Na)。

实施例4

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯异丙酯

使粗产物在异丙醇中结晶，得到标题产物，为白色固体，收率92％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.2ppm(2d，6H)，3.2ppm(s，3H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，4.75ppm(hep，1H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.0ppm(d，1H)；

质谱466.0(M+Na)。

实施例5

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯异丁酯

使粗产物在异丙醇/乙醇中结晶，得到标题产物，为白色固体，收率92％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝0.85ppm(d，6H)，1.85ppm(hep，1H)，3.2ppm(s，3H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.45ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱480.0(M+Na)。

实施例6

碳酸环丙基甲酯(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，然后在乙酸乙酯/己烷中结晶，得到标题产物，为白色固体，收率72％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝0.25ppm(dd，2H)，0.55ppm(dd，2H)，1.05(m，1H)，3.2ppm(s，3H)，3.9ppm(d，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.45ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱477.9(M+Na)。

实施例7

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯3-甲基丁-2-烯酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色泡沫状物，收率80％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.65ppm(s，3H)，1.70ppm(s，3H)，3.2ppm(s，3H)，4.25-4.7ppm(m，5H)，5.25ppm(t，1H)，5.9ppm(d，1H)，6.45ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱491.8(M+Na)。

实施例8

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯异戊酯

使粗产物在乙酸乙酯/己烷中重结晶，得到标题产物，为白色固体，收率85％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝0.85ppm(d，6H)，1.45ppm(m，2H)，1.60ppm(hep，1H)，3.2ppm(s，3H)，4.10ppm(m，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.9ppm(d，1H)，6.45ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱494.1(M+Na)。

实施例9

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯戊-3-基酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色固体，收率73％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝0.8ppm(dt，6H)，1.5ppm(m，4H)，3.2ppm(s，3H)，4.3-4.7ppm(m，4H)，5.95ppm(d，1H)，6.45ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱493.9(M+Na)。

实施例10

碳酸环己基酯(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯

粗产物经硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色固体，收率75％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.1-1.9ppm(m，10H)，3.2ppm(s，3H)，4.3-4.65ppm(m，4H)，5.95ppm(d，1H)，6.45ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱505.0(M+Na)。

实施例11

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯2-甲氧基乙酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色半固体，收率78％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝3.15ppm(s，3H)，3.25ppm(s，3H)，3.5ppm(m，2H)，4.2ppm(m，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.95ppm(d，1H)，6.45ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱481.9(M+Na)。

实施例12

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯2-乙氧基乙酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色半固体，收率33％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.05ppm(t，3H)，3.15ppm(s，3H)，3.4ppm(q，2H)，3.55ppm(m，2H)，4.2ppm(m，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.95ppm(d，1H)，6.45ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱496.0(M+Na)。

实施例13

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯2-丁氧基乙酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色半固体，收率93％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝0.85ppm(t，3H)，1.25ppm(m，2H)，1.45ppm(m，2H)，3.15ppm(s，3H)，3.35ppm(t，2H)，3.55ppm(m，2H)，4.2ppm(m，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.95ppm(d，1H)，6.45ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱524.0(M+Na)。

实施例14

碳酸苄酯(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯

使粗产物在异丙醇/乙醇中结晶，得到标题产物，为白色固体，收率88％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝3.2ppm(s，3H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.15ppm(s，2H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.38ppm(s，5H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱514.0(M+Na)。

实施例15

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯4-甲基苄酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色泡沫状物，收率73％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝2.3ppm(s，3H)，3.2ppm(s，3H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.07ppm(s，2H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.15ppm(d，2H)，7.25ppm(d，2H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱528.0(M+Na)。

实施例16

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯4-甲氧基苄酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色半固体，收率41％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝3.2ppm(s，3H)，3.75ppm(s，3H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.05ppm(s，2H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，6.9ppm(d，2H)，7.25ppm(d，2H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱543.9(M+Na)。

实施例17

(S)-2-(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙氧基)羰基氧基)丙酸乙酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色半固体，收率71％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.15ppm(t，3H)，1.4ppm(d，3H)，3.2ppm(s，3H)，4.15ppm(q，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，4.95ppm(q，1H)，5.98ppm(d，1H)，6.42ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H)；

质谱523.9(M+Na)。

实施例18

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯十二烷基酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色半固体，收率35％。

H¹-NMR(CDCl₃)，δ＝0.9ppm(t，3H)，1.2-1.4ppm(m，18H)，1.65-1.75(m，2H)，3.1ppm(s，3H)，4.1-4.6ppm(m，5H)，5.95ppm(s，1H)，6.05ppm(d，1H)，6.95ppm(d，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.95ppm(d，2H).

实施例19

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯十八烷基酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色固体，收率42％。

H¹-NMR(CDCl₃)，δ＝0.9ppm(t，3H)，1.2-1.4ppm(m，30H)，1.65-1.75(m，2H)，3.05ppm(s，3H)，4.1-4.6ppm(m，5H)，5.9ppm(s，1H)，6.02ppm(d，1H)，6.98ppm(d，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.95ppm(d，2H).

实施例20

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯-(3R，S)-3，7-二甲基辛-6-烯酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色固体，收率30％。所示结构说明该物质为异构体混合物。

H¹-NMR(CDCl₃)，δ＝0.9ppm(d，3H)，1.1-2.0ppm(m，13H)，3.05ppm(s，3H)，4.1-4.6ppm(m，5H)，5.05ppm(t，1H)，5.9ppm(s，1H)，6.0ppm(d，1H)，7.0ppm(d，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.95ppm(d，2H).

实施例21

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯2-(2-甲氧基乙氧基)乙酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色固体。

H¹-NMR(CDCl₃)，δ＝3.05ppm(s，3H)，3.38ppm(s，3H)，3.55-3.65ppm(m，6H)，4.25-4.6ppm(m，5H)，5.9ppm(s，1H)，6.0ppm(d，1H)，7.05ppm(d，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.95ppm(d，2H).

实施例22

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯辛酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到需要的产物，得到标题产物，为白色固体，收率44％。

H¹-NMR(CDCl₃)，δ＝0.9ppm(t，3H)，1.2-1.4ppm(m，12H)，1.65-1.75(m，2H)，3.05ppm(s，3H)，4.1-4.6ppm(m，5H)，5.9ppm(s，1H)，6.0ppm(d，1H)，6.9ppm(d，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.95ppm(d，2H).

实施例23

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯2-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)乙酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色半固体物质，收率31％。

H¹-NMR(CDCl₃)，δ＝3.05ppm(s，3H)，3.38ppm(s，3H)，3.55-3.7ppm(m，10H)，4.2-4.6ppm(m，5H)，5.95ppm(m，2H)，7.25ppm(d，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.95ppm(d，2H).

实施例24

碳酸(1R，2S)-1-(4-(6-氰基吡啶-3-基)苯基)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟丙酯乙酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色泡沫状物，收率97％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.19ppm(t，3H)，4.1ppm(q，2H)，4.25-4.6ppm(m，3H)，5.05ppm(s，2H)，5.9ppm(d，1H)，6.2ppm(t，1H)，7.5ppm(d，2H)，7.85ppm(d，2H)，8.1ppm(d，1H)，8.35ppm(d，1H)，9.1ppm(s，1H)，9.3ppm(d，1H).

实施例25

碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-氟甲基磺酰基)苯基)丙酯乙酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到定量收率的标题产物，为白色泡沫状物。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.2ppm(t，3H)，4.1ppm(q，2H)，4.3-4.7ppm(m，3H)，5.7ppm(d，2H)，5.95ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.85ppm(d，2H)，7.95ppm(d，2H)，9.05ppm(d，1H).

实施例26

通过与二醇的双氯甲酸酯反应合成氟苯尼考前药及其类似物

参见图5，将双氯甲酸酯E(1摩尔当量，0.34M)的无水四氢呋喃溶液放入滴液漏斗，在0℃下，在氮气氛下，滴加到含底物C(2.2摩尔当量，0.64M)、4-N，N-二甲基氨基吡啶(0.5摩尔当量)和三乙胺(2.2摩尔当量)的无水四氢呋喃溶液中。将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在室温下过夜。将得到的溶液通过滤纸快速过滤，将铵盐除去。将滤液浓缩，加入乙酸乙酯，将粗产物溶解。将得到的溶液依次用1MHCl(水溶液)、饱和NaHCO₃(水溶液)和饱和NaCl(水溶液)洗涤，然后通过硅胶和Na₂SO₄垫快速过滤。将滤液浓缩，得到的粗产物通过硅胶闪柱层析纯化，得到纯碳酸酯前药F。

通过以上方法得到以下化合物：

实施例26

二碳酸二((1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-氟-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙基)乙-1，2-二基酯

粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到标题产物，为白色半固体，收率62％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝3.2ppm(s，6H)，4.3-4.7ppm(m，10H)，5.95ppm(d，2H)，6.42ppm(s，2H)，7.6ppm(d，4H)，7.9ppm(d，4H)，9.05ppm(d，2H)；质谱852.9(M+Na)。

实施例27-30

氯霉素型苯丙醇的苄基碳酸酯前药(H和I)的合成

参见图6，使用以下方法。

方法I

将氯甲酸乙酯B(2.2摩尔当量，0.34M)的无水四氢呋喃溶液放入滴液漏斗中，在0℃下，在氮气氛下，滴加到含底物G(1摩尔当量，0.64M)、4-N，N-二甲基氨基吡啶(0.5摩尔当量)和三乙胺(2.4摩尔当量)的无水四氢呋喃溶液中。将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在室温下过夜。将得到的溶液通过滤纸快速过滤，将铵盐除去。将滤液浓缩，加入乙酸乙酯，将粗产物溶解。将得到的溶液依次用1M HCl(水溶液)、饱和NaHCO₃(水溶液)和饱和NaCl(水溶液)洗涤，然后通过硅胶和Na₂SO₄垫快速过滤。将滤液浓缩，将得到的产物减压干燥，得到纯碳酸酯前药H。

方法II

将氯甲酸乙酯B(1摩尔当量，0.34M)的无水四氢呋喃溶液放入滴液漏斗中，在0℃下，在氮气氛下，滴加到含底物G(1摩尔当量，0.64M)、4-N，N-二甲基氨基吡啶(0.5摩尔当量)和三乙胺(2.4摩尔当量)的无水四氢呋喃溶液中。将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在室温下过夜。将得到的溶液通过滤纸快速过滤，将铵盐除去。将滤液浓缩，加入乙酸乙酯，将粗产物溶解。将得到的溶液依次用1M HCl(水溶液)、饱和NaHCO₃(水溶液)和饱和NaCl(水溶液)洗涤，然后通过硅胶和Na₂SO₄垫快速过滤。将滤液浓缩，得到的粗产物通过硅胶闪柱层析纯化，得到纯碳酸酯前药H和I。

通过以上方法得到以下实施例化合物：

实施例编号化合物名

27 二碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-1-(4-硝基苯基)丙-1，3-二基酯二乙酯

28 碳酸(1R，2R)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-羟基-1-(4-硝基苯基)丙酯乙酯

29 二碳酸(1R，2R)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙-1，3-二基酯二乙酯

30 碳酸(1R，2R)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-羟基-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯乙酯

实施例27

二碳酸(1R，2S)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-1-(4-硝基苯基)丙-1，3-二基酯二乙酯

通过以上方法I得到产物，得到标题产物，为白色泡沫状物，收率88％。也可通过方法II得到产物，得到标题产物，为白色泡沫状物，收率25％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.2ppm(m，6H)，4.05-4.25ppm(m，6H)，4.5ppm(m，1H)，5.95ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，8.2ppm(d，2H)，8.95ppm(d，1H).

实施例28

碳酸(1R，2R)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-羟基-1-(4-硝基苯基)丙酯乙酯

通过以上方法II得到产物，得到标题产物，为白色泡沫状物，收率19％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.2ppm(t，3H)，3.35ppm(m，1H)，3.45ppm(m，1H)，4.0-4.2ppm(m，3H)，5.19ppm(t，1H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，8.2ppm(d，2H)，8.75ppm(d，1H).

实施例29

二碳酸(1R，2R)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙-1，3-二基酯二乙酯

通过以上方法II得到粗产物，得到标题产物，为白色泡沫状物，收率19％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.2ppm(m，6H)，3.19ppm(s，3H)，4.05-4.25ppm(m，6H)，4.45ppm(m，1H)，5.9ppm(d，1H)，6.4ppm(s，1H)，7.6ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.95ppm(d，1H).

实施例30

碳酸(1R，2R)-2-(2，2-二氯乙酰氨基)-3-羟基-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)丙酯乙酯

通过以上方法II得到粗产物，得到标题产物，为白色泡沫状物，收率20％。

H¹-NMR(DMSO-d₆)，δ＝1.2ppm(t，3H)，3.2ppm(s，3H)，3.35ppm(m，1H)，3.45ppm(m，1H)，4.0-4.2ppm(m，3H)，5.19ppm(t，1H)，5.85ppm(d，1H)，6.42ppm(s，1H)，7.58ppm(d，2H)，7.9ppm(d，2H)，8.75ppm(d，1H).

实施例31-35

氟苯尼考苄基碳酸酯前药的实用性评价

实施例31

组合物的粘度

下表4提供浓度相当于300mg/ml氟苯尼考(30％重量/体积)的选择的氟苯尼考苄基碳酸酯前药给药溶液的注射能力的评价。

表4

^a对应于35％(重量/体积)浓度的氟苯尼考的苄基碳酸酯前药的浓度

^b用每毫升300mg氟苯尼考、250mg N-甲基-2-吡咯烷酮、150mg丙二醇和适量聚乙二醇300的溶液制备的溶液

^c通过下述点滴注射器方法评价。

讨论

为方便给予必需量的需要量的抗生素，苯丙醇或包含在苯丙醇前药中的苯丙醇药物的浓度通常必须高。由于苯丙醇类在注射制剂可接受的许多有机溶剂或溶剂混合物的溶解度有限，故为制备高浓度的氟苯尼考溶液可选择的溶剂受到限制。因此，溶于有机溶剂或溶剂混合物的高浓度苯丙醇药物溶液可变得很粘稠，难以通过注射器给药。因此，苯丙醇苄基碳酸酯前药在更宽范围的注射剂可接受的有机溶剂或溶剂混合物中的溶解能力为制备低粘性注射液的高浓度溶液提供潜力。表4显示溶于有机溶剂的混合物实例的氟苯尼考苄基碳酸酯前药浓溶液的注射能力的对比，这些溶剂混合物通常是皮下或肌内注射给药可接受的。制备含相当于

制剂浓度的氟苯尼考浓度(mg/mL)的氟苯尼考苄基碳酸酯测试溶液。通过“使注射器点滴”方法评价溶液的注射能力，其中在自由重力流动条件下，在15℃下，测量由垂直放置的注射器流出的等体积的此类溶液的点滴时间(秒)。抽出5ml聚乙烯一次性注射器(5ml Luer，N om-Ject Zentrish/Henke Saas WolfGMBH)的伸缩杆后，给注射器安装一次性针头(

16G1 PrecisionGlide/BentonDickinson & CO)，从顶部将试验溶液吸入注射器，按一式三份，记录2mL(3ml与1ml之间的刻度)溶液自由流动必需的时间。通过用测量的市售

制剂样品(输入号13)的点滴时间除试验溶液(输入号1-12)的点滴时间，计算相对于的注射能力。如表4中结果证明，含苯甲醇粘性稀释剂的试验溶液的注射能力具有的相对注射能力<1.00，因此好于(30％重量/体积氟苯尼考的丙二醇/聚乙二醇300/2-甲基吡咯烷酮溶液)。由于它们较好的注射能力，这些溶液代表注射递送氟苯尼考的更有利制剂。实施例2氟苯尼考苄基碳酸酯的不含苯甲醇粘性稀释剂的三醋精/2-吡咯烷酮-1/1溶液是唯一注射能力比

(输入号5)的差的溶液。含浓度高于(输入号2；35％w/v对30％w/v)的氟苯尼考的实施例2氟苯尼考苄基碳酸酯溶液也显示较优注射能力。有意义的是，含相当于30％w/v混合形式的游离氟苯尼考和氟苯尼考苄基碳酸酯前药(输入号11-12)的氟苯尼考溶液的溶液也显示优于

制剂的注射能力。

实施例32

熔点和水溶解度对比

可由苯丙醇类碳酸酯前药或苯丙醇类的苄基碳酸酯前药(苯丙醇类似物)得到的改良的物理化学性质对于得到需要的给予动物的有机溶剂基制剂的能力很重要。相对于母体苯丙醇类，苯丙醇苄基碳酸酯前药在某些有机溶剂或有机溶剂混合物中的高溶解度部分是因为此类碳酸酯前药的熔点相对于母体药物低。这些低熔点反映减少的碳酸酯前药的晶格能，该能量是增加的溶解度的原因。在氟苯尼考前药的各实施例中，可用晶体形式的氟苯尼考熔点对比见下表5。

在某些治疗应用中，用浓有机溶液皮下给予氟苯尼考，其中形成导致需要的药物缓释到循环中的定位药物贮库是已知的。在此类情况中，氟苯尼考在水性介质中的溶解度代表决定缓释速度的重要因素之一。影响由皮下贮库部位缓释氟苯尼考的另一个重要因素是给药溶液的浓度和制剂的溶剂组合物。除可用于可接受的氟苯尼考苄基碳酸酯前药制剂的更宽范围溶剂外，这些前药也允许宽范围的水溶性。测量的多种氟苯尼考苄基碳酸酯前药的水溶解度见表5。这些前药的溶解度范围为略微低于至显著低于氟苯尼考的溶解度。此类前药的减少的水溶解度可用于在皮下贮库部位控制前药的溶出速度和可使母体药物实现最佳缓释。

表5

^a-不结晶；将柱层析流分中的溶剂蒸发后，如果得到固体物质，则测量熔点。

实施例33

在有机溶剂(三醋精/苯甲醇2:1混合物)中溶解度的对比

下表6说明氟苯尼考等同物的溶解度，该溶解度是在用苯甲醇作为低粘性成分的实施例溶剂混合物三醋精/苯甲醇2:1(体积/体积)中用选择的苄基碳酸酯氟苯尼考前药得到的。用苄基碳酸酯氟苯尼考前药得到需要的等于或大于30％(重量/体积)的浓度。氟苯尼考母体药物不溶于三醋精/苯甲醇2:1(体积/体积)，浓度甚至低至10％(重量/体积)。有意义的是，当氟苯尼考的苄基碳酸酯前药也存在时，氟苯尼考在三醋精/苯甲醇2:1(体积/体积)中变得更易溶。275mg/ml的实施例14前药和100mg/ml的氟苯尼考的组合溶于三醋精/苯甲醇2:1(体积/体积)，得到氟苯尼考的含量为30％(重量/体积)的稳定溶液(上表4，输入号12)。

表6

实施例34

苄基碳酸酯前药在体外酶促释放母体氟苯尼考

作为游离母体药物来源的母体药物分子的前药衍生物在体内有效作用的能力决定特定前药的治疗效用。可通过给予动物前药后测量母体药物的全身水平，确定在内源性酶的存在下前药在体内释放母体药物的能力。可通过与动物全血、血浆或血清混合后测量母体药物释放，评价该体外释放度。在体外与牛血清混合后，检测选择的氟苯尼考的苄基碳酸酯前药的氟苯尼考释放。如下表7所示，试验化合物显示出有利的母体药物释放特性。实施例8和14化合物显示出氟苯尼考在血清中的释放速度最大。出现较高降解和释放速度的氟苯尼考碳酸酯的亲酯性更强的共同趋势似乎在参加试验的化合物中都存在。发现一个有意义的例外是实施例26(二-氟苯尼考碳酸酯)。

表7

^aBQL-低于定量限

将50微升碳酸酯前药贮备液(10mg/mL的DMSO溶液)加入5mL供体牛血清，混合。按400微升等份试样，将得到的溶液转移到1.5mL塑料离心管中。将各塑料管放入37℃水浴中，温育。在0、1、2、4、8和24小时取出样品，加入400微升乙腈后，反应终止，快速搅拌30秒。通过在Eppendorf5415G上按14000rpm离心5分钟，将沉淀除去。从澄清上清液中取样，进行HPLC分析。用氟苯尼考的峰面积计算前药的转化率。

HPLC条件如下：

系统： Agilent 1100系列

柱： Varian Microsorb-5μ，C18，150mm×2.1mm

柱温： 30℃

流速： 0.5mL/min

进样体积： 40μl

有机溶液：乙腈

水溶液： 0.1％甲酸的水溶液

运行时间： 20min

梯度如下：

时间(mm) 有机溶液％

0 5

15 40

17 40

18 5

当在体外用血清酶处理后，表7中给出的选择的前药在牛血清中的稳定性的试验结果证明氟苯尼考的苄基碳酸酯释放母体药物。这些结果提供了氟苯尼考的苄基碳酸酯是存在于牛血清中的水解酶的底物的证据。

实施例35

苄基碳酸酯前药在体内释放母体氟苯尼考

给予前药后，如下测定活性抗生素的体内药代动力学特性：

1.用两种不同的动物证实活性抗生素的体内释放：

通过静脉内(＂IV＂)途径给予大鼠和牛患者实施例18前药化合物，然后测定随时间采集的血浆中的氟苯尼考浓度。

下表8数据说明IV给予大鼠和牛实施例18前药化合物后，得到的氟苯尼考血浆水平。

表8

化合物的实施例编号	动物种	剂量(mg/kg)	途径	AUC(hr·mg/L)	Cmax(mg/L)
化合物的实施例编号	动物种	剂量(mg/kg)	途径	AUC(hr·mg/L)	Cmax(mg/L)	18	大鼠(n＝3)	20	IV	26.4±16.8	6.2±3.8
18	牛(n＝3)	10	IV	20.2±2.8	0.6±0.1	18	大鼠(n＝3)	20	IV	26.4±16.8	6.2±3.8

2.通过不同途径给予前药后，由前药释放的活性抗生素：

下表9数据说明通过两种不同途径即IV和皮下(＂SC＂)给予实施例2前药化合物后得到的氟苯尼考的血浆水平。

表9

化合物的实施例编号	动物种	剂量(mg/kg)	途径	AUC(hr·mg/L)	Cmax(mg/L)
化合物的实施例编号	动物种	剂量(mg/kg)	途径	AUC(hr·mg/L)	Cmax(mg/L)	2	牛(n＝3)	9	IV	18±1.7	3.6±0.8
2	牛(n＝3)	18	SC	42.6±13.7	1.6±0.8	2	牛(n＝3)	9	IV	18±1.7	3.6±0.8

3.活性部分释放的剂量依赖性增加

下表10数据证明给予递增剂量的实施例2前药化合物后，活性抗生素(氟苯尼考)的血浆水平按剂量依赖性增加。

表10

化合物的实施例编号	动物种	剂量(mg/kg)	途径	AUC(hr·mg/L)	Cmax(mg/L)
化合物的实施例编号	动物种	剂量(mg/kg)	途径	AUC(hr·mg/L)	Cmax(mg/L)	2	牛(n＝3)	18	SC	42.6±13.7	1.6±0.8
2	牛(n＝5)	42	SC	152.6±77	2.7±1.3	2	牛(n＝3)	18	SC	42.6±13.7	1.6±0.8

4.活性部分的释放时间：

a.下表11和12的数据证明给予不同种动物实施例2前药化合物后，在不到半小时内释放的活性抗生素(氟苯尼考)。

表11

通过IV途径，按20mg/kg给予大鼠

表12

通过IV途径，按9mg/kg给予牛

b.下表13和14的数据证明当通过IV和SC途径给予牛后，实施例2前药化合物迅速释放活性抗生素。

表13

通过SC途径，按48mg/kg给予牛

表14

通过IV途径，按9mg/kg给予牛

5.制剂的效果：

苯丙醇碳酸酯前药的三醋精/苯甲醇制剂的优点

通过给予三醋精/苯甲醇(2:1重量/体积比例)制剂和给予三醋精/2-吡咯烷酮(2:1重量/体积比例)制剂，比较实施例2化合物的释放动力学。用牛(n＝3)进行研究。

按20mg/kg剂量，用三醋精/2-吡咯烷酮，SC给予实施例2化合物后的平均AUC值为42.6hr·mg/L。

按40mg/kg剂量，用三醋精/苯甲醇，SC给予实施例2化合物后的平均AUC值为152.1hr·mg/L。

因为用于两个研究的剂量不同，所以计算剂量归一化的值，三醋精/2-吡咯烷酮和三醋精/苯甲醇的值分别为2.13hr/L(42.6/20)和3.8hr/L(152.1/40)。

6.皮下给予实施例2苄基碳酸酯前药后，氟苯尼考在牛中的生物利用度

计算实施例2化合物的药代动力学数据：

活性部分(氟苯尼考)的总平均AUC＝152.11hr·mg/L

实施例2化合物的总平均AUC＝38.04，它又等于30.43hr·mg/L氟苯尼考等同物

一旦从SC部位吸收，83.5％MC-9148转化为氟苯尼考。

实施例2化合物的效力研究

SC给予患自然发生的牛呼吸疾病(BRD)的牛后，将单剂量的(Schering-Plough Animal Health)与单剂量的实施例2前药化合物的疗效进行对比。结果如下：

表15

^*300mg/ml氟苯尼考

^**相当于40mg/kg氟苯尼考

^***盐水处理动物研究在第3天中断，因为疾病症状无改善。

总之，观察到实施例2前药释放的氟苯尼考的效力可与市场品牌的氟苯尼考

)相比。

结论

因此可以意识到，本发明提供新的苯丙醇抗生素前药和它们在动物或人中治疗或预防细菌感染的使用方法。

尽管用某些实施方案和实施例阐述了本发明，但在不偏离本发明范围的前提下，可对所示实施方案和实施例进行改变对本领域技术人员而言是显而易见的。

Claims

1.一种式I苯丙醇碳酸酯或其溶剂合物：

式I

其中R₁选自：

和

R₂选自二氯甲基、二氟甲基、氯氟甲基、氯代甲基和甲基，

R₄和R₅独立选自取代的或未取代的C_1-10直链、支链或环状烷基；取代的或未取代的C_1-10烷氧基烷基；C_1-10芳基；C_1-10芳基烷基；取代的或未取代的C_1-10直链、支链或环烯基。

2.权利要求1的苯丙醇碳酸酯，其中当R₁为NO₂时，R₃不为CH₂O-C(O)O-R₅。

3.权利要求1的苯丙醇碳酸酯，其中R₄和R₅独立选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、异戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十二烷基、正十八烷基、2-甲基-丁基、1-乙基-丙基、3-甲基-丙-2-烯基、2-甲氧基-乙基、2-乙氧基-乙基、2-丙氧基-乙基、2-丁氧基-乙基、1-甲基-2-甲氧基-乙基、环丙基-甲基、环戊基-甲基、环己基-甲基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、3，7-二甲基辛-6-烯基、苄基、2-甲基-苄基、3-甲基-苄基、4-甲基-苄基、2-甲氧基-苄基、3-甲氧基-苄基、4-甲氧基-苄基、甲基-2-呋喃基、2-(甲氧基-乙氧基)-乙基、2-(乙氧基-乙氧基)-乙基、2-[2-(甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-[2-(乙氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-(羟基-乙氧基)-乙基、2-[2-(羟基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-乙酰氧基-乙基、2-(乙酰氧基-乙氧基)-乙基、3-乙酰氧基-丙基、2-羧基-乙基、3-羧基-丙基、4-羧基-丁基、2-甲氧基羰基-乙基、3-甲氧基羰基-丙基、4-甲氧基羰基-丁基、2-甲氧基羰基-苄基、3-甲氧基羰基-苄基、4-甲氧基羰基-苄基、1-乙氧基羰基-乙基、1-甲氧基羰基-乙基、苯基、4-甲基-苯基、4-甲氧基-苯基、4-羧基-苯基、2-羧基-苯基、4-甲氧基羰基-苯基、2-甲氧基羰基-苯基和4-乙酰氨基-苯基。

4.权利要求3的苯丙醇碳酸酯，其中R₄和R₅独立被选自以下的部分取代：甲基、甲氧基、羧基、烷氧羰基和酰氧基。

5.权利要求3的苯丙醇碳酸酯，其中R₁选自

和

R₂为二氯甲基或二氟甲基，且R₃选自羟甲基、氟代甲基和CH₂O-C(O)O-R₅。

6.权利要求1的苯丙醇碳酸酯，其中R₁为CH₃SO₂，R₂为CHCl₂，且R₃为CH₂F。

7.权利要求6的氟苯尼考碳酸酯，其中R₄选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、异戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十二烷基、正十八烷基、2-甲基-丁基、1-乙基-丙基、3-甲基-丙-2-烯基、2-甲氧基-乙基、2-乙氧基-乙基、2-丙氧基-乙基、2-丁氧基-乙基、1-甲基-2-甲氧基-乙基、环丙基-甲基、环戊基-甲基、环己基-甲基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、3，7-二甲基辛-6-烯基、苄基、2-甲基-苄基、3-甲基-苄基、4-甲基-苄基、2-甲氧基-苄基、3-甲氧基-苄基、4-甲氧基-苄基、甲基-2-呋喃基、2-(甲氧基-乙氧基)-乙基、2-(乙氧基-乙氧基)-乙基、2-[2-(甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-[2-(乙氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-(羟基-乙氧基)-乙基、2-[2-(羟基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-乙酰氧基-乙基、2-(乙酰氧基-乙氧基)-乙基、3-乙酰氧基-丙基、2-羧基-乙基、3-羧基-丙基、4-羧基-丁基、2-甲氧基羰基-乙基、3-甲氧基羰基-丙基、4-甲氧基羰基-丁基、2-甲氧基羰基-苄基、3-甲氧基羰基-苄基、4-甲氧基羰基-苄基、1-乙氧基羰基-乙基、1-甲氧基羰基-乙基、苯基、4-甲基-苯基、4-甲氧基-苯基、4-羧基-苯基、2-羧基-苯基、4-甲氧基羰基-苯基、2-甲氧基羰基-苯基和4-乙酰氨基-苯基。

8.权利要求1的苯丙醇碳酸酯，其中R₃为CH₂F。

9.权利要求1的苯丙醇碳酸酯，其中R₁为CH₃SO₂或NO₂，R₂为CHCl₂，R₃为OH，且R₄为乙基。

10.权利要求1的苯丙醇碳酸酯，其中R₁为CH₃SO₂或NO₂，R₂为CHCl₂，R₃为

且R₄为乙基。

11.权利要求1的苯丙醇碳酸酯，所述碳酸酯选自

和

12.权利要求1的苯丙醇碳酸酯，所述碳酸酯选自表2中列举的化合物。

13.一种苯丙醇碳酸酯，所述碳酸酯包括式II化合物

式II

其中R₁选自

和

其中a、c和e是独立在0-4数值范围的整数，

b和d是独立在0-2数值范围的整数，

条件是整数a、b、c、d和e的和在2-8的数值范围，

R₅₁和R₅₂独立选自H、甲基、羟基、甲氧基和乙酰氧基。

14.权利要求13的化合物，其中a、b、c、d和e的和的数值范围为2-4。

15.权利要求13的化合物，其中R₁为

16.权利要求13的化合物，所述化合物具有选自以下的结构：

和

17.一种药用组合物，所述组合物含有有效量的权利要求1的苯丙醇碳酸酯以及药学上可接受的赋形剂或溶剂。

18.一种药用组合物，所述组合物含有有效量的权利要求13的苯丙醇碳酸酯以及药学上可接受的赋形剂或溶剂。

19.一种药用组合物，所述组合物含有有效量的权利要求6的苯丙醇碳酸酯以及药学上可接受的赋形剂或溶剂。

20.权利要求17的药用组合物，所述组合物还包含氟尼辛。

21.权利要求20的药用组合物，所述组合物还包含相应的苯丙醇，其中所述相应的苯丙醇是与所述苯丙醇碳酸酯在体内释放的苯丙醇相同的苯丙醇。

22.权利要求19的药用组合物，所述组合物还包含氟尼辛。

23.权利要求18的药用组合物，所述组合物还包含氟尼辛。

24.权利要求23的药用组合物，所述组合物还包含相应的苯丙醇，其中所述相应的苯丙醇是与所述苯丙醇碳酸酯在体内释放的苯丙醇相同的苯丙醇。

25.一种药用组合物，所述组合物含有有效量的权利要求1的苯丙醇碳酸酯以及药学上可接受的赋形剂或溶剂，并含有相应的苯丙醇，其中所述相应的苯丙醇是与所述苯丙醇碳酸酯在体内释放的苯丙醇相同的苯丙醇。

26.一种药用组合物，所述组合物含有有效量的权利要求13的苯丙醇碳酸酯以及药学上可接受的赋形剂或溶剂，并含有相应的苯丙醇，其中所述相应的苯丙醇是与所述苯丙醇碳酸酯在体内释放的苯丙醇相同的苯丙醇。

27.权利要求17的药用组合物，所述组合物还包含至少一种其它治疗药物。

28.权利要求18的药用组合物，所述组合物还包含至少一种其它治疗药物。

29.权利要求17的药用组合物，所述组合物还包含氟苯尼考。

30.权利要求18的药用组合物，所述组合物还包含氟苯尼考。

31.权利要求27的药用组合物，其中所述其它治疗药物是抗生素化合物。

32.权利要求28的药用组合物，其中所述其它治疗药物是抗生素化合物。

33.权利要求31的药用组合物，其中所述抗生素化合物是阿弗菌素，所述阿弗菌素选自伊维菌素、多拉克丁、阿巴克丁、司拉克丁、因灭汀、依立诺克丁、莫昔克丁、米尔倍霉素及其组合。

34.一种药用组合物，所述组合物包含权利要求1的苯丙醇碳酸酯和组合应用的式III苯丙醇化合物

式III

其中式I苯丙醇碳酸酯和式III苯丙醇按50：1-1：50重量的比例存在，其中R₁为CH₃SO₂，R₂为CHCl₂，且R₃为OH或F。

35.权利要求17的药用组合物，其中所述苯丙醇碳酸酯占所述组合物的重量约80％-约5％。

36.权利要求33的药用组合物，其中所述阿弗菌素化合物存在的量为约0.03％w/v-约20％w/v。

37.权利要求33的药用组合物，所述组合物还包含杀吸虫剂。

38.权利要求17的药用组合物，其中所述溶剂包含至少一种药学上可接受的醇。

39.权利要求38的药用组合物，其中所述醇为苯甲醇。

40.权利要求38的药用组合物，其中所述组合物的所述醇含量为所述组合物重量的约5％-约98％。

41.权利要求38的药用组合物，其中所述组合物的所述醇含量为约20％-约45％重量。

42.一种在有需要的动物中治疗或预防疾病或病症的方法，所述方法包括给予药物有效量的权利要求1的苯丙醇碳酸酯。

43.一种在有需要的动物中治疗或预防疾病或病症的方法，所述方法包括给予药物有效量的权利要求13的苯丙醇碳酸酯。

44.权利要求42的方法，其中所述苯丙醇碳酸酯给予的量按动物重量计为约1-约150mg/kg。

45.权利要求42的方法，其中所述动物是哺乳动物、鸟类动物、鱼、爬行动物或无脊椎动物。

46.权利要求42的方法，其中在给予所述苯丙醇碳酸酯之前、之后或同时，给予有需要的动物至少一种其它治疗药物。

47.权利要求42的方法，其中所述其它药物是抗生素化合物。

48.权利要求47的方法，其中所述抗生素化合物是阿弗菌素，所述阿弗菌素选自伊维菌素、多拉克丁、阿巴克丁、司拉克丁、因灭汀、依立诺克丁、莫昔克丁和米尔倍霉素。

49.一种在有需要的动物中治疗或预防疾病或病症的方法，所述方法包括给予药物有效量的化合物，所述化合物选自实施例1-30的化合物及其组合。

50.一种合成权利要求1的化合物的方法，所述方法包括在合适的溶剂中使苯丙醇化合物与相应的氯甲酸酯反应。

51.权利要求50的方法，其中所述溶剂选自氯化溶剂、酯溶剂、聚醚溶剂、甲醛缩醛醚、环醚、酮、混合醚-酯溶剂和二甘醇醚。

52.权利要求50的方法，其中所述溶剂包括四氢呋喃。

53.权利要求50的方法，其中在催化剂的存在下进行所述反应。

54.权利要求53的方法，其中所述催化剂选自4-二甲基氨基-吡啶、4-甲基吡啶、吡啶及其组合。

55.权利要求50的方法，其中在酸清除剂的存在下进行所述反应。

56.权利要求55的方法，其中所述酸清除剂选自三乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾及其组合。

57.权利要求50的方法，其中所述氯甲酸酯是

其中R₄选自甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、异戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、正十二烷基、正十八烷基、2-甲基-丁基、1-乙基-丙基、3-甲基-丙烯-2-基、2-甲氧基-乙基、2-乙氧基-乙基、2-丙氧基-乙基、2-丁氧基-乙基、1-甲基-2-甲氧基-乙基、环丙基-甲基、环戊基-甲基、环己基-甲基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、3，7-二甲基辛-6-基、苄基、2-甲基-苄基、3-甲基-苄基、4-甲基-苄基、2-甲氧基-苄基、3-甲氧基-苄基、4-甲氧基-苄基、甲基-2-呋喃基、2-(甲氧基-乙氧基)-乙基、2-(乙氧基-乙氧基)-乙基、2-[2-(甲氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-[2-(乙氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-(羟基-乙氧基)-乙基、2-[2-(羟基-乙氧基)-乙氧基]-乙基、2-乙酰氧基-乙基、2-(乙酰氧基-乙氧基)-乙基、3-乙酰氧基-丙基、2-羧基-乙基、3-羧基-丙基、4-羧基-丁基、2-甲氧基羰基-乙基、3-甲氧基羰基-丙基、4-甲氧基羰基-丁基、2-甲氧基羰基-苄基、3-甲氧基羰基-苄基、4-甲氧基羰基-苄基、1-乙氧基羰基-乙基、1-甲氧基羰基-乙基、苯基、4-甲基-苯基、4-甲氧基-苯基、4-羧基-苯基、2-羧基-苯基、4-甲氧基羰基-苯基、2-甲氧基羰基-苯基和4-乙酰氨基-苯基。

58.权利要求50的方法，其中所述苯丙醇化合物具有以下结构：

其中R₁选自

和

其中R₂选自二氯甲基、二氟甲基、氯氟甲基、氯代甲基和甲基。

59.权利要求50的方法，其中在反应期间，相对于所述苯丙醇化合物所述氯甲酸酯摩尔过量存在。

60.一种合成权利要求13的化合物的方法，所述方法包括在合适的溶剂中使苯丙醇化合物与相应的双氯甲酸酯反应，其中相对于所述氯甲酸酯，所述苯丙醇化合物摩尔过量存在。

61.权利要求60的方法，其中所述苯丙醇是

且所述双氯甲酸酯是

其中R₁选自

和

且R₂选自二氯甲基、二氟甲基、氯氟甲基、氯代甲基和甲基。